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篇(1)

[關(guān)鍵詞]林麝；分子遺傳學(xué)；分子標(biāo)記；人工繁育；泌香

林麝Moschusberezovskii又名麝鹿、香獐，屬偶蹄目Artiodactyla、麝科Moschidae、麝屬M(fèi)oschus，是目前養(yǎng)殖規(guī)模較大、數(shù)量最多的麝科動(dòng)物之一。雄麝香腺分泌的外激素――麝香在傳統(tǒng)中藥領(lǐng)域發(fā)揮著重要的作用[1-2]。由于國(guó)際香料市場(chǎng)和醫(yī)療行業(yè)對(duì)麝香需求量的大增，人類(lèi)“殺麝取香”和對(duì)其棲息地的嚴(yán)重破壞，已使該物種野生種群數(shù)量急劇減少，現(xiàn)存麝類(lèi)已面臨瀕危。目前，林麝已被列人CITES附錄Ⅰ中，《中國(guó)瀕危動(dòng)物紅皮書(shū)》將麝列為瀕?；蛞孜?dòng)物[3]。我國(guó)1988年頒布的野生動(dòng)物保護(hù)法將林麝列為國(guó)家二級(jí)保護(hù)動(dòng)物，2002年又將其提升為一級(jí)保護(hù)動(dòng)物。麝的珍貴引起了許多生物學(xué)工作者的濃厚興趣，在林麝的生態(tài)學(xué)[4]、行為學(xué)[5]、分類(lèi)學(xué)[6]、生理學(xué)[7]以及麝香的藥理學(xué)與臨床應(yīng)用[8]等方面開(kāi)展了積極的探索。

近年來(lái)，隨著現(xiàn)代生物技術(shù)的不斷發(fā)展，細(xì)胞生物學(xué)、分子生物學(xué)等新興生物技術(shù)開(kāi)始被不斷地運(yùn)用到林麝遺傳育種工作中，為林麝的育種保護(hù)工作注入新的活力。其中，以新興發(fā)展起來(lái)的分子遺傳標(biāo)記技術(shù)最引人注目，分子遺傳標(biāo)記的出現(xiàn)使基于此類(lèi)標(biāo)記的選擇育種技術(shù)有了實(shí)現(xiàn)的可行性，顯現(xiàn)出了巨大的應(yīng)用潛力。當(dāng)前，分子遺傳標(biāo)記在林麝遺傳育種中的應(yīng)用主要體現(xiàn)在遺傳分類(lèi)、人工繁育、泌香、疾病等方面。本文就分子遺傳學(xué)在林麝研究中的應(yīng)用現(xiàn)狀做一綜述，并對(duì)后期研究進(jìn)行了展望，以期為提高林麝的生產(chǎn)性能提供參考。

1林麝分子遺傳標(biāo)記

分子遺傳標(biāo)記是基于DNA差異進(jìn)行個(gè)體或群體遺傳多樣性分析的有力工具。常用于林麝遺傳多樣性分析的分子標(biāo)記方法有AFLP，mtDNA，微衛(wèi)星DNA等。

AFLP技術(shù)在種群結(jié)構(gòu)和差異的調(diào)查中起著非常重要作用[9]。陳軒[10]根據(jù)AFLP分子標(biāo)記的特點(diǎn)，以四川養(yǎng)麝研究所白沙養(yǎng)麝場(chǎng)21只林麝樣品和金鳳山養(yǎng)麝場(chǎng)14只林麝樣品為材料，對(duì)2個(gè)種群的遺傳多樣性進(jìn)行了比較分析，結(jié)果發(fā)現(xiàn)四川養(yǎng)麝研究所白沙養(yǎng)麝場(chǎng)圈養(yǎng)的2個(gè)林麝種群均具有較高水平的遺傳多樣性，但金鳳山種群具有相對(duì)較高的遺傳多樣性。趙莎莎[11]利用相同的原材料進(jìn)一步檢測(cè)了22對(duì)選擇性引物組合，共獲得了908個(gè)AFLP多態(tài)片段，結(jié)果證明了麝香高產(chǎn)組在多態(tài)位點(diǎn)比率（PPL）上極顯著高于參照組和低產(chǎn)組，在遺傳多樣性水平上也有更高的整體競(jìng)爭(zhēng)優(yōu)勢(shì)。

mtDNA是核外遺傳物質(zhì)，由于mtDNA的控制區(qū)富含A，T堿基，屬于遺傳高變區(qū)，進(jìn)化速度比其他區(qū)域快，多態(tài)性豐富，常被應(yīng)用到野生動(dòng)物群體遺傳多樣性檢測(cè)中。彭紅元等[12]通過(guò)分析四川省3個(gè)本地種群中林麝mtDNA控制區(qū)域582bp片段，發(fā)現(xiàn)94個(gè)變異位點(diǎn)，在109個(gè)個(gè)體中檢測(cè)出27個(gè)單倍型，表明3個(gè)群體間很少進(jìn)行遺傳交流，建議建立系譜以增加群體間基因的交流。2014年，馮慧等[13]調(diào)查了陜西省林麝1個(gè)圈養(yǎng)種群3個(gè)野生種群mtDNAD-Loop632bp片段的遺傳多樣性和種群結(jié)構(gòu)，結(jié)果表明，陜西省林麝群體mtDNAD-loop區(qū)序列存在著較豐富的變異和遺傳多樣性，鳳縣野生群體和鳳縣養(yǎng)殖場(chǎng)群體的核苷酸多樣性和單倍型多樣較高，養(yǎng)殖場(chǎng)種群沒(méi)有出現(xiàn)近親繁殖及遺傳多樣性下降的情況。鳳縣野生群體和鳳縣養(yǎng)殖場(chǎng)群體兩者遺傳分化較小，存在著較高的基因流水平。

微衛(wèi)星DNA廣泛分布與真核生物基因組中，具有多態(tài)性高、共顯性遺傳、選擇中性、易于操作等特點(diǎn)，是一種極具應(yīng)用價(jià)值的分子遺傳標(biāo)記，由于微衛(wèi)星重復(fù)序列在群體間和不同的個(gè)體間通常表現(xiàn)出很高的序列變異性，并且這種變異呈共顯遺傳，因而在微衛(wèi)星重復(fù)序列廣泛應(yīng)用于物種遺傳多樣分析。2004年，鄒方東[14]運(yùn)用微衛(wèi)星標(biāo)記法構(gòu)建了3個(gè)林麝基因組微衛(wèi)星富集文庫(kù)，每個(gè)文庫(kù)含有上萬(wàn)個(gè)轉(zhuǎn)化子。2005年，Zou等[15]又運(yùn)用了改進(jìn)的富集文庫(kù)方式來(lái)分離微衛(wèi)星位點(diǎn)，獲得了野生林麝的多態(tài)位點(diǎn)，結(jié)果發(fā)現(xiàn)70%的基因組文庫(kù)為（AC）_n文庫(kù)，8個(gè)微衛(wèi)星位點(diǎn)呈現(xiàn)高度多態(tài)性，可作為研究林麝的分子遺傳標(biāo)記。2006年，夏珊[16]對(duì)構(gòu)建林麝的微衛(wèi)星文庫(kù)篩選了6個(gè)多態(tài)性好的座位，并對(duì)林麝的遺傳多樣性進(jìn)行初步的分析，6個(gè)微衛(wèi)星座位的多態(tài)信息含量（PIC）最低為0.6214，最高為0.7984，說(shuō)明這6個(gè)林麝微衛(wèi)星座位具有高度多態(tài)性，進(jìn)一步證明了微衛(wèi)星DNA是很好的分子遺傳標(biāo)記。

2林麝遺傳分類(lèi)研究

目前，對(duì)林麝的遺傳分類(lèi)有3種研究手段，分別為形態(tài)解剖學(xué)、細(xì)胞遺傳學(xué)和分子生物學(xué)。一種是根據(jù)外形、頭骨和距骨的形態(tài)特點(diǎn)以及生態(tài)習(xí)性、分布等認(rèn)為麝確是一個(gè)獨(dú)立物種[17]。陳服官等[18]根據(jù)林麝生物標(biāo)本，再一次肯定了這種分類(lèi)方法。林麝作為麝科動(dòng)物一個(gè)亞種除了在形態(tài)解剖學(xué)上得到了明確的肯定外，從細(xì)胞遺傳學(xué)特征來(lái)看，也得到了有力的支持。細(xì)胞的染色體組型和染色體帶型都代表著種的特性，它為不同物種在分類(lèi)研究和確定其在進(jìn)化過(guò)程中的位置提供了一個(gè)重要的依據(jù)。2004年，鄒方東等[19]以林麝外周血淋巴細(xì)胞為實(shí)驗(yàn)材料，首先建立了適合林麝淋巴細(xì)胞增殖的培養(yǎng)體系，并用培養(yǎng)出的細(xì)胞制備染色體，確定林麝核型是2N=58，且全都是端著絲粒染色體，還首次應(yīng)用染色體G-帶技術(shù)，對(duì)林麝染色體的G-帶帶型進(jìn)行了研究，確定了林麝染色體是2N=58，且全都是端著絲粒染色體，這與其他鹿科動(dòng)物存在較大差異。結(jié)果表明，從細(xì)胞遺傳學(xué)角度將麝分為單獨(dú)一科也是比較合理的。

隨著分子生物學(xué)的發(fā)展，麝作為獨(dú)立的科在分子水平上相繼得到了印證。Kuznetsova等[20]對(duì)鹿科家族成員和其他偶蹄動(dòng)物的線(xiàn)粒體基因12S和16SrRNA（2445bp）的序列和核β-spectrin基因（828bp）的區(qū)域進(jìn)行分析，發(fā)現(xiàn)鹿科和麝存在幾個(gè)分子共源性特征。劉學(xué)東等[21]則利用測(cè)得梅花鹿、坡鹿、原麝和林麝的線(xiàn)粒體12SrRNA基因全序列，與GenBank中檢索到的鼷鹿、長(zhǎng)頸鹿和牛12SrRNA基因全序列進(jìn)行對(duì)比，分別應(yīng)用ME，ML，MP方法重建系統(tǒng)樹(shù)，發(fā)現(xiàn)3種樹(shù)拓?fù)浣Y(jié)構(gòu)一致，結(jié)果顯示麝、鹿、牛、長(zhǎng)頸鹿均各自為單系群，且麝作為一個(gè)單系進(jìn)化。此外，采用PCR技術(shù)和序列測(cè)定方法從線(xiàn)粒體DNA上得到367bp的細(xì)胞色素b基因片段序列，分析其序列可得出在麝、獐、麂和鹿的系統(tǒng)進(jìn)化中，麝約在600萬(wàn)年前與鹿科分歧，而鹿科的3個(gè)亞科是在350～500萬(wàn)年前開(kāi)始分歧，表明麝可單獨(dú)作為麝科[22]。張亮則采用克隆SRY基因的CDS區(qū)的方法，得到林麝和馬麝的SRY基因，對(duì)其進(jìn)行分析顯示，支持麝作為獨(dú)立一科的觀點(diǎn)[23]。2009年，彭紅元等[12]測(cè)定了林麝全線(xiàn)粒體序列，分別運(yùn)用MP，Baryes方法與其他22種反芻亞目的動(dòng)物相關(guān)基因序列進(jìn)行系統(tǒng)進(jìn)化分析，表明林麝與鹿科動(dòng)物的親緣關(guān)系最為接近，并單獨(dú)形成一支，在?？坪吐箍浦胺只鰜?lái)，為鹿科、?？苹榻忝萌骸?012年，馮慧等[13]從秦嶺林麝的毛發(fā)樣品中提取得到線(xiàn)粒體DNACytb基因的部分序列，并對(duì)其進(jìn)行序列分析，發(fā)現(xiàn)林麝、原麝、馬麝、喜馬拉雅麝、黑麝是5種獨(dú)立的種，林麝與原麝的親緣關(guān)系最近，進(jìn)一步彌補(bǔ)了現(xiàn)有形態(tài)分類(lèi)研究的不足，得到更有說(shuō)服力的分析結(jié)果。截至目前，運(yùn)用各種克隆方法得到的林麝DNA序列，對(duì)其分析后發(fā)現(xiàn)其遺傳學(xué)分類(lèi)與形態(tài)解剖學(xué)、細(xì)胞遺傳學(xué)得到的結(jié)果是相同，對(duì)麝作為單獨(dú)一個(gè)物種的結(jié)果進(jìn)行了充分的肯定。

3林麝分子遺傳學(xué)在人工繁育上的應(yīng)用

經(jīng)過(guò)50多年的發(fā)展，我國(guó)在林麝的人工繁育方面取得了不少優(yōu)秀成果。但是，由于基礎(chǔ)研究及資金等方面的問(wèn)題，我國(guó)的圈養(yǎng)林麝規(guī)模一直徘徊在6000只左右[24]，并且在林麝養(yǎng)殖過(guò)程中出現(xiàn)的種群退化、后代抗病力下降等問(wèn)題也不斷凸顯，因此，加大對(duì)林麝的人工繁育研究，特別是基礎(chǔ)研究工作力度顯得尤為重要。2004年，鄒方東等[25]首次成功克隆了與林麝生殖相關(guān)的核β-A亞基成熟肽序列，為林麝的人工繁育和麝資源的保護(hù)利用提供了相關(guān)基礎(chǔ)資料。也有人對(duì)俄羅斯西伯利亞地區(qū)、遠(yuǎn)東地區(qū)和薩哈林島的麝進(jìn)行遺傳多樣性分析，發(fā)現(xiàn)隨著棲息地的分裂，麝的近親繁殖遺傳多樣性在不斷上升，進(jìn)而出現(xiàn)種群隔離現(xiàn)象[26]。此外，岳碧松研究團(tuán)隊(duì)對(duì)四川省米亞羅、金鳳、馬爾康3個(gè)養(yǎng)殖場(chǎng)的林麝進(jìn)行微衛(wèi)星分析，表明都是有效的群體規(guī)模，其遺傳結(jié)構(gòu)具有重要的保護(hù)意義，并建議在林麝人工育種時(shí)應(yīng)當(dāng)充分考慮這種遺傳結(jié)構(gòu)[27]，這為林麝的選育工作提供了新的認(rèn)識(shí)。2013年，岳碧松研究團(tuán)隊(duì)再次對(duì)四川米亞羅地區(qū)人工繁育林麝的多態(tài)性進(jìn)行微衛(wèi)星分析，發(fā)現(xiàn)由于引入新的血緣，林麝的雜合程度和遺傳多樣性在不斷增加[28]，為林麝的人工繁殖管理提供了一種新的方法。

4分子遺傳學(xué)與林麝泌香的關(guān)系

獲取麝香是保護(hù)林麝遺傳資源的本質(zhì)因素，提高麝香的產(chǎn)量，對(duì)林麝泌香相關(guān)的研究已經(jīng)從組織解剖水平深入到泌香分子機(jī)制的研究。陳軒[10]分析了林麝AFLP的多態(tài)性與產(chǎn)香量的關(guān)系，篩選出34個(gè)在高產(chǎn)組和低產(chǎn)組間等位基因頻率分布有顯著（P參照組>低產(chǎn)組（P

白康[29]采用PCR-SSCP、測(cè)序分析等生物技術(shù)手段對(duì)雄性激素受體（AR）基因外顯子1，4，8進(jìn)行研究，結(jié)果顯示，AR基因外顯子1，4，8在所做樣本中不存在多態(tài)性，說(shuō)明雄性林麝AR基因外顯子（1，4，8）在林麝中具有高度保守性。王勤等[30]克隆了調(diào)控林麝的繁殖和泌香的重要垂體激素FSH-β和LH-β基因，這為開(kāi)展林麝泌香過(guò)程中基因表達(dá)的關(guān)聯(lián)分析提供了一定的理論依據(jù)。

5分子遺傳學(xué)與林麝疾病相關(guān)分析

麝類(lèi)疾病是長(zhǎng)期阻礙林麝人工養(yǎng)殖發(fā)展的關(guān)鍵因素。隨著分子生物學(xué)的發(fā)展，分子遺傳標(biāo)記技術(shù)已經(jīng)運(yùn)用到林麝的疾病診治過(guò)程中，這為尋找麝類(lèi)疾病起因，制定相應(yīng)抗體提供了一種新的借鑒方法。羅燕等[31]對(duì)林麝肺源致病性Escherichiacoli毒力基因進(jìn)行了檢測(cè)及鑒定，為進(jìn)一步研究林麝肺源致病性E.coli的致病機(jī)制奠定了基礎(chǔ)，同時(shí)為防治林麝E.coli性肺炎提供了依據(jù)。2013年，鄒丹丹等[32]克隆和表達(dá)了林麝IL-1β基因，為其用于林麝疾病的防治奠定基礎(chǔ)。李靈等[33]以四川養(yǎng)麝研究所的115只林麝個(gè)體為對(duì)象，通過(guò)對(duì)MHCⅡ類(lèi)經(jīng)典的DR和DQ座位的分離、遺傳變異分析和化膿性疾病相關(guān)性的分析，揭示了林麝MHCⅡ基因多態(tài)性的維持機(jī)制及其與化膿性疾病的密切關(guān)系。周鑫等[34]為調(diào)查林麝肺源致病性大腸桿菌O因子血清型以及相關(guān)耐藥基因的流行狀況，采用玻板凝集反應(yīng)法進(jìn)行O因子血清型鑒定，同時(shí)用PCR方法檢測(cè)耐藥基因，發(fā)現(xiàn)29株菌皆攜帶多種耐藥基因，這對(duì)林麝臨床科學(xué)合理用藥有重要指導(dǎo)意義。

6問(wèn)題及展望

6.1存在的問(wèn)題

6.1.1林麝馴化程度低，對(duì)分子遺傳工作的開(kāi)展帶來(lái)極大不便從1958年以來(lái)，全國(guó)陸陸續(xù)續(xù)開(kāi)展了林麝的馴化研究，并取得了一定的成果，其中包括陜西鎮(zhèn)坪、四川馬爾康、重慶南川等養(yǎng)殖基地[35-37]。但由于科研經(jīng)費(fèi)有限及林麝養(yǎng)殖效益等問(wèn)題，馴化研究并沒(méi)有持續(xù)，這造成了林麝的馴化程度很低。這給林麝分子遺傳研究過(guò)程中的樣品采集、生產(chǎn)性能測(cè)定等工作帶來(lái)極大不便，也給林麝帶來(lái)強(qiáng)烈的應(yīng)激反應(yīng)。強(qiáng)烈的應(yīng)激反應(yīng)不僅給實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)的可靠性與穩(wěn)定性造成一定程度的影響，還對(duì)林麝自身的健康造成不利影響。

6.1.2林麝為一級(jí)保護(hù)動(dòng)物且價(jià)格昂貴，限制了某些分子遺傳相關(guān)工作的開(kāi)展林麝為國(guó)家一級(jí)珍稀瀕危藥用動(dòng)物，不允許因?yàn)榭茖W(xué)研究而對(duì)林麝有任何傷害，因此無(wú)法及時(shí)地采集林麝內(nèi)臟進(jìn)行深入的分子生物學(xué)相關(guān)研究，只能采集林麝毛發(fā)、血液或因疾病死亡林麝的內(nèi)臟，這給林麝分子遺傳學(xué)相關(guān)研究帶來(lái)了不便。同時(shí)，由于林麝資源量有限，存在非常嚴(yán)重的炒種情況，目前每對(duì)林麝的價(jià)格被炒到7萬(wàn)元，昂貴的種源成本大大降低了林麝產(chǎn)香的盈利能力，也大大提高了林麝研究的成本，這種現(xiàn)象不僅嚴(yán)重阻礙了林麝分子遺傳相關(guān)研究，而且不利于整個(gè)林麝養(yǎng)殖產(chǎn)業(yè)的健康發(fā)展。

6.1.3相關(guān)科研人員稀缺，發(fā)展緩慢目前，相對(duì)與其他常見(jiàn)動(dòng)物，從事林麝相關(guān)工作的人員極少，主要分布在四川養(yǎng)麝研究所、重慶市藥物種植研究所、四川大學(xué)、華東師范大學(xué)、浙江大學(xué)、陜西動(dòng)物研究所等科研院所，幾乎沒(méi)有進(jìn)行過(guò)林麝養(yǎng)殖行業(yè)的專(zhuān)題研討及技術(shù)交流會(huì)。因此先進(jìn)的分子生物學(xué)技術(shù)在林麝上應(yīng)用的時(shí)間相對(duì)靠后，這也大大地降低了林麝遺傳學(xué)相關(guān)研究的進(jìn)展。

6.2展望

6.2.1麝香資源奇缺是林麝分子遺傳學(xué)研究開(kāi)展的內(nèi)在動(dòng)力麝香具有極高的藥用價(jià)值，但由于麝香的產(chǎn)量極低，遠(yuǎn)遠(yuǎn)不能滿(mǎn)足市場(chǎng)需求，這使得麝香的價(jià)格長(zhǎng)期維持在黃金的3倍左右，因此，提高麝香產(chǎn)量就成為了林麝養(yǎng)殖行業(yè)的最重要目標(biāo)。但由于林麝資源量極少且馴化程度低，傳統(tǒng)遺傳育種方法很難在林麝上得到順利開(kāi)展，因此通過(guò)分子遺傳學(xué)方法篩選麝香高產(chǎn)分子標(biāo)記越來(lái)越成為關(guān)注的焦點(diǎn)。

6.2.2新技術(shù)新方法的應(yīng)用將大大加快林麝分子遺傳學(xué)研究進(jìn)展林麝分子遺傳學(xué)研究隨著分子生物技術(shù)的不斷進(jìn)步已經(jīng)取得了長(zhǎng)足發(fā)展，DNA條形碼鑒定物種技術(shù)[38]、DNA分子性別鑒定技術(shù)[39]已成功運(yùn)用在林麝遺傳資源保護(hù)與與繁育工作中。然而，相對(duì)于林麝如此豐富的遺傳背景，僅靠分子生物學(xué)技術(shù)遠(yuǎn)遠(yuǎn)不夠，而且相關(guān)的研究成果得不到充分應(yīng)用，因此有必要進(jìn)一步了解林麝的遺傳結(jié)構(gòu)，將傳統(tǒng)研究方法和分子生物技術(shù)相結(jié)合，了解其遺傳結(jié)構(gòu)差異和特征，進(jìn)行針對(duì)性保護(hù)和利用。另外，為了促進(jìn)人工養(yǎng)麝事業(yè)的發(fā)展，提高林麝種群增長(zhǎng)率和麝香產(chǎn)量，須繼續(xù)加強(qiáng)對(duì)林麝的泌香性狀、疾病抗性等表型的標(biāo)記研究，為實(shí)現(xiàn)標(biāo)記輔助選擇（MAS），加速良種培育打下基礎(chǔ)。

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篇(2)

關(guān)鍵詞：抑郁；遺傳；環(huán)境；性別差異

分類(lèi)號(hào)：B845

1 引言

抑郁通常用來(lái)指一系列范圍較廣的情緒問(wèn)題，包括輕微的消極情緒到嚴(yán)重的情緒障礙。主要表現(xiàn)為悲傷、苦惱等消極情緒，伴隨著退縮、注意力渙散等行為特征，重性抑郁患者還表現(xiàn)出失眠、厭食等軀體癥狀（cassano&Fava，2002；Compas，Ey，&Grant，1993）。抑郁是個(gè)體主要的情緒障礙和心理健康問(wèn)題之一。在世界范圍內(nèi)，抑郁也是造成傷殘和疾病負(fù)擔(dān)的5種主要原因之一（Caspi et al.，2003）。

20世紀(jì)60年代以來(lái)，伴隨著行為遺傳學(xué)的興起，愈來(lái)愈多的研究者開(kāi)始關(guān)注遺傳因素在抑郁發(fā)生發(fā)展中的作用。早期雙生子研究顯示，兒童青少年抑郁的遺傳力約為0.24-0.55（Happonen etal。，2002；Rice，Harold，&Thapar，2002a）。近年來(lái)，繼Caspi等人（2003）里程碑式的研究之后，采用分子遺傳學(xué)范式探究抑郁的遺傳基礎(chǔ)及其與環(huán)境的相互作用機(jī)制成為抑郁研究領(lǐng)域的前沿課題之一。隨著研究的深入，對(duì)于抑郁遺傳基礎(chǔ)的研究不斷獲得新的發(fā)現(xiàn)和突破，其中，較為引人注目的就是遺傳因素（Aslund et al.，2009；Eley et al.，2004；Jacobson&Rowe，1999；Jansson et alJ，2004）及其與環(huán)境的交互作用（Hammen，Brennan，Keenan-Miller，Hazel，&Najman，2010；sj8berg etal.，2006；Vaske，Beaver，Wright，Boisvert，&Makarios，2009）對(duì)抑郁的影響存在顯著性別差異。

考察抑郁遺傳基礎(chǔ)性別差異的表現(xiàn)及其原因，有助于推進(jìn)抑郁產(chǎn)生機(jī)制的研究，對(duì)于解釋抑郁的發(fā)生特點(diǎn)亦具有重要啟示。鑒于此，本文對(duì)既有抑郁遺傳基礎(chǔ)的性別差異的相關(guān)研究進(jìn)行綜述，進(jìn)而從性激素、環(huán)境敏感性及中間表型3個(gè)方面分析性別差異的原因，并在此基礎(chǔ)上展望了未來(lái)研究的方向。

2 抑郁遺傳基礎(chǔ)的性別差異

通過(guò)對(duì)該領(lǐng)域相關(guān)文獻(xiàn)的梳理，我們發(fā)現(xiàn)定量行為遺傳學(xué)研究主要比較抑郁遺傳率的性別差異，較早期的分子行為遺傳學(xué)研究考察基因與抑郁簡(jiǎn)單關(guān)聯(lián)的性別差異，隨著研究深入，研究者開(kāi)始探討抑郁基因一環(huán)境交互作用（GxE）的性別差異。鑒于此，本文按照其發(fā)展沿革將抑郁遺傳基礎(chǔ)的性別差異歸納為兩個(gè)方面：一是基因?qū)σ钟舻闹苯有?yīng)，二是基因與環(huán)境的交互效應(yīng)（詳見(jiàn)表1）。

2.1 遺傳直接效應(yīng)的性別差異

早期研究大多采用數(shù)量遺傳學(xué)中的雙生子范式考察抑郁遺傳基礎(chǔ)的性別差異。雙生子研究通過(guò)比較同卵雙生子和異卵雙生子在心理發(fā)展特征上的相似程度來(lái)了解遺傳和環(huán)境對(duì)表型變異的相對(duì)貢獻(xiàn)，以遺傳率作為衡量遺傳效應(yīng)大小的指標(biāo)，即在某一群體的表型變異中，遺傳效應(yīng)所占的比例（曹叢，王美萍，張文新，陳光輝，2012；Plomin，DeFries，McCleam，&McGuffin，2001）。采用這種范式，Jacobson和Rowe（1999）以自我報(bào)告的方式對(duì)美國(guó)青少年健康追蹤研究中的2302名青少年（平均年齡16歲）雙生子進(jìn)行了調(diào)查，結(jié)果顯示女性抑郁情緒的遺傳率大于男性。之后，Jansson等人（2004）以1918名瑞典老年雙生子為被試的研究也發(fā)現(xiàn)女性抑郁的遺傳率高于男性，而且這種性別差異不受抑郁測(cè)評(píng)方式（二分法或連續(xù)記分法）的影響。此外，Scourfield等人（2003）以?xún)和嗌倌辏?-17歲）為被試，以母親報(bào)告的被試抑郁癥狀為指標(biāo)，考察了抑郁遺傳率的性別差異問(wèn)題，其研究結(jié)果亦表明女孩的抑郁遺傳率高于男孩。

近年來(lái)，隨著分子遺傳學(xué)的興起與發(fā)展，越來(lái)越多的研究者采用分子遺傳學(xué)的方法對(duì)抑郁遺傳基礎(chǔ)的性別差異進(jìn)行了考察。目前，大多數(shù)抑郁研究考察了5一羥色胺系統(tǒng)基因、多巴胺系統(tǒng)基因與抑郁的關(guān)聯(lián)，例如5-HTTLPR（serotonin.transporter-linked promoter region，5-羥色胺轉(zhuǎn)運(yùn)體）基因、MAOA（monoamine oxidase A，單胺氧化酶A）基因、COMT（catechol-O-methyltransferase，兒茶酚胺氧位甲基轉(zhuǎn)移酶）基因和DRD2 （D2dopamine receptor，多巴胺D2型受體）基因等。相關(guān)候選基因可以通過(guò)降解（如MAOA、COMT）和轉(zhuǎn)運(yùn)（如5-HTTLPR）功能調(diào)節(jié)突觸間隙中5一羥色胺或多巴胺的水平，也可以改變腦內(nèi)受體數(shù)量（如DRD2基因）調(diào)節(jié)信號(hào)傳導(dǎo)，進(jìn)而影響個(gè)體抑郁水平。

該領(lǐng)域的研究為抑郁遺傳基因，特別是5-HTTLPR基因?qū)σ钟粲绊懙男詣e差異提供了進(jìn)一步的證據(jù)，并且諸多研究一致表明5-HTTLPR基因與女性抑郁存在密切關(guān)聯(lián)。譬如，Eley（2004）等人以377名10-20歲青少年為被試的研究發(fā)現(xiàn)，攜帶5-HTTLPR S等位基因（SS和SL基因型，研究者按照5-HTTLPR區(qū)域上重復(fù)序列的數(shù)量將基因型劃分為由14個(gè)重復(fù)序列組成的短等位基因S和由16個(gè)重復(fù)序列組成的長(zhǎng)等位基因L1的女性抑郁水平較低，但是5-HTTLPR基因與男性抑郁無(wú)關(guān)。Aslund（2009）等人以1482名17-18歲瑞典青少年為被試進(jìn)行研究，結(jié)果亦發(fā)現(xiàn)5-HTTLPR基因多態(tài)性?xún)H對(duì)女性的抑郁存在直接效應(yīng)，攜帶ss基因型的女性其患抑郁的風(fēng)險(xiǎn)較低，但該基因多態(tài)性與男性抑郁無(wú)關(guān)。Uddin及其同事的一系列研究也表明5-HTTLPR基因僅對(duì)女性抑郁存在直接效應(yīng)，具體表現(xiàn)為攜帶SL基因型的女性抑郁水平較低（Uddin et al.，2010；Uddin。De losSantos，Bakshis，Cheng，&Aiello，2011）。由此可見(jiàn)。5-HTTLPR基因與抑郁的關(guān)聯(lián)存在顯著的性別差異，但與此同時(shí)我們也注意到這些研究結(jié)果在具體基因型上仍然存在分歧，這或許與對(duì)5-HTTLPR基因rs25531多態(tài)性位點(diǎn)功能的劃分有關(guān)，需要未來(lái)研究進(jìn)一步進(jìn)行探討。

需要指出的是，有小部分研究發(fā)現(xiàn)某些遺傳基因的直接效應(yīng)只存在于男性群體中。如Nyman等人（2011）采用北芬蘭出生序列（Northem FinlandBirth Cohort）追蹤研究中的5225名成人為被試。探索多種候選基因與環(huán)境風(fēng)險(xiǎn)因素在抑郁發(fā)展中的作用，研究結(jié)果發(fā)現(xiàn)，DRD2基因僅與男性抑郁癥狀顯著相關(guān)（Nyman et al.，201 1）。此外，Baekken等人以北特倫德拉格健康研究fNord-TrondelagHealth Study）中的5531名成人為被試，研究COMT基因與焦慮抑郁的關(guān)系，結(jié)果表明在男性群體中，攜帶Met/Met基因型的個(gè)體患抑郁的可能性顯著低于Val/Val基因型攜帶者，但在女性中沒(méi)有發(fā)現(xiàn)該趨勢(shì)（Baekken，Skorpen，Stordal。Zwart，&Hagen，2008）。

綜上所述，雙生子和分子遺傳學(xué)研究均表明遺傳因素對(duì)抑郁的直接效應(yīng)存在性別差異.而且分子遺傳學(xué)研究資料進(jìn)一步顯示，不同遺傳基因?qū)δ信畟€(gè)體抑郁的影響是不同的，5-HTTLPR可能是女性抑郁的風(fēng)險(xiǎn)基因，而對(duì)男性抑郁來(lái)說(shuō)，COMT和DRD2基因的影響可能更大。

2.2 遺傳與環(huán)境交互作用的性別差異

采用基因一環(huán)境設(shè)計(jì)考察抑郁的遺傳基礎(chǔ)是當(dāng)前行為遺傳學(xué)研究領(lǐng)域的前沿課題之一，諸多研究表明抑郁的GxE效應(yīng)存在顯著的性別差異。如Barr等人（2004）選擇與人類(lèi)直系同源的恒河猴為研究對(duì)象（恒河猴與人類(lèi)在5-HTTLPR上具有相同的基因多態(tài)性），考察了5-HTTLPR基因與早期不利事件（early adversity）對(duì)壓力刺激時(shí)的促。腎上腺皮質(zhì)激素和皮質(zhì)醇分泌的影響，結(jié)果發(fā)現(xiàn)由同伴養(yǎng)育（即早期不利處境）的雌性恒河猴中，攜帶5-HTTLPR S等位基因的個(gè)體促腎上腺皮質(zhì)激素分泌增加，總體皮質(zhì)醇水平下降（通常這一激素的反應(yīng)模式被認(rèn)為與壓力導(dǎo)致的神經(jīng)障礙有關(guān)），但在雄性中沒(méi)有出現(xiàn)該反應(yīng)模式。

除動(dòng)物研究外，以人類(lèi)為被試的研究也發(fā)現(xiàn)了同樣的性別差異模式。例如，Eley等（2004）和Aslund等人（2009）的研究一致表明5-HTTLPR基因與負(fù)性生活事件（失業(yè)、重病、喪親等）或虐待對(duì)抑郁的交互作用存在性別差異，攜帶S等位基因的女性在遭遇負(fù)性生活事件或虐待時(shí)，更容易出現(xiàn)抑郁癥狀。Hammen等人（2010）以346名青年為被試的研究發(fā)現(xiàn)攜帶5-HTTLPR S等位基因的個(gè)體，在15歲時(shí)經(jīng)歷的慢性家庭壓力（父母關(guān)系質(zhì)量、親子關(guān)系質(zhì)量等）越多，其成年后的抑郁水平越高，但這一交互效應(yīng)只存在于女性群體中。Vaske等人以2023名青少年為被試，考察了DRD2基因TaqlA多態(tài)性與壓力性生活事件對(duì)抑郁的交互效應(yīng)，結(jié)果僅在非裔美國(guó)女性中發(fā)現(xiàn)了GxE效應(yīng)（Vaske et al.，2009）。

然而，也有小部分研究獲得了不同的研究結(jié)果。sjoberg等人（2006）以200名青少年（16.19歲）為被試，考察了5-HTTLPR與心理社會(huì)壓力f創(chuàng)傷性家庭沖突、父母離異、居住地環(huán)境）對(duì)抑郁的影響，發(fā)現(xiàn)在男性和女性群體中GxE交互作用模式截然相反，在女性中，攜帶s等位基因的個(gè)體在經(jīng)歷了創(chuàng)傷性家庭沖突后其抑郁水平顯著高于未經(jīng)歷家庭沖突的女性，然而在男性中，當(dāng)攜帶L等位基因的個(gè)體處于風(fēng)險(xiǎn)環(huán)境（父母離異或居住條件不良等）中時(shí)，其患抑郁的風(fēng)險(xiǎn)較高。與此類(lèi)似，Brummett等（2008）分別以288名和142名成人為被試進(jìn)行了兩項(xiàng)研究，結(jié)果均發(fā)現(xiàn)攜帶5-HTTLPR S等位基因的女性在面臨壓力性生活事件（親屬重病、社經(jīng)地位）時(shí)，更容易出現(xiàn)抑郁癥狀，而攜帶5-HTTLPR L等位基因的男性在面臨壓力性生活事件時(shí)抑郁水平較高。最近，Priess-Grobe和Hyde（2013）以309名青少年為被試，考察了5-HTTLPR基因與負(fù)性生活事件（親屬死亡、父母離異等）對(duì)抑郁的影響以及MAOA基因與性別的調(diào)節(jié)作用（5-HTTLPR×負(fù)性生活事件×MAOA×性別），也發(fā)現(xiàn)在攜帶低活性MAOA基因型的個(gè)體中，5-HTTLPR基因與負(fù)性生活事件對(duì)抑郁的交互作用存在性別差異，攜帶S等位基因的女性經(jīng)歷的負(fù)性生活事件越多其抑郁水平越高，而在經(jīng)歷了負(fù)性生活事件的男性中，只有攜帶L等位基因的個(gè)體才表現(xiàn)出抑郁癥狀。以上3項(xiàng)研究似乎表明，面臨壓力時(shí)攜帶s等位基因的女孩容易患抑郁，而同樣情況下攜帶L基因的男性患抑郁的風(fēng)險(xiǎn)較高。此外，Nyman等人（2011）的研究結(jié)果表明COMT基因rs4680多態(tài)性與環(huán)境的交互效應(yīng)僅在男性中顯著，攜帶G等位基因的男性在經(jīng)歷了環(huán)境壓力后抑郁水平較高（Nyman et al.，2011）。

通過(guò)分析上述研究可以發(fā)現(xiàn)，抑郁的GxE效應(yīng)存在顯著的性別差異，并且在女性群體中的研究結(jié)果基本一致，如在壓力環(huán)境下，攜帶5-HTTLPR S等位基因的女性的抑郁水平較高。但是，在男性群體中所獲得的結(jié)論仍存在分歧。

導(dǎo)致男性群體中既有研究結(jié)論存在分歧的原因可能有以下幾個(gè)方面：（1）多數(shù)研究采用的是單基因一環(huán)境交互作用的研究范式，而沒(méi)有考察多基因的交互效應(yīng)。人類(lèi)行為具有復(fù)雜的遺傳基礎(chǔ)，多數(shù)人類(lèi)行為并不像單基因遺傳疾?。ㄈ绾嗤㈩D舞蹈?。┠菢泳哂星逦?jiǎn)潔的模式，而是會(huì)依賴(lài)于環(huán)境因素和多種基因的交互作用（McGuffin，Riley，&Plomin，2001）。事實(shí)上，已有研究證實(shí)了多種基因間存在交互效應(yīng)，并且提供了與單基因研究不同的結(jié)果，如上述Priess-Groben和Hyde（20131的研究結(jié)果顯示，同時(shí)攜帶低活性MAOA和5-HTTLPR L等位基因的男性在經(jīng)歷了負(fù)性生活事件后抑郁水平較高，這與Aslund等人（2009）的單基因研究結(jié)果不一致。（2）研究者所選擇的環(huán)境指標(biāo)不同。多數(shù)研究只考察了壓力性生活事件等直接對(duì)個(gè)體產(chǎn)生影響的近端風(fēng)險(xiǎn)因素（proximalrisk factors，指直接對(duì)個(gè)體產(chǎn)生影響的社會(huì)和身體經(jīng)驗(yàn)，如負(fù)性生活事件、虐待等），如Eley等（2004）、Aslund等（2009）和Vaske（2009）等人以不利生活事件、虐待等為環(huán)境指標(biāo)，均發(fā)現(xiàn)僅在女性群體中存在GxE效應(yīng)，而少數(shù)不一致的研究則選擇了遠(yuǎn)端風(fēng)險(xiǎn)因素（distal risk factors，指間接對(duì)個(gè)體產(chǎn)生影響的歷史、文化、人口及地理特征等因素，如地區(qū)貧困水平等），如Uddin等（2010）選擇了地區(qū)貧困水平等遠(yuǎn)端環(huán)境指標(biāo)，發(fā)現(xiàn)僅在男性群體中存在G×E效應(yīng)，而Moffitt等人指出遠(yuǎn)端環(huán)境的效應(yīng)受到近端環(huán)境的調(diào)節(jié)（Moffitt，Caspi，&Rutter，2006），因而近端和遠(yuǎn)端風(fēng)險(xiǎn)因素的選擇可能對(duì)研究結(jié)果具有重要影響。（3）研究對(duì)象的年齡不同。Moffitt等人（2006）指出在研究基因與不利環(huán)境對(duì)抑郁的作用時(shí)，年齡可能是導(dǎo)致大部分研究結(jié)果不一致的重要因素。如Eley等（2004）、Aslund（2009）等人選擇青少年為被試的研究發(fā)現(xiàn)僅在女性群體中存在GxE效應(yīng)，但是Brummett等（2008）以中老年人為被試的研究卻發(fā)現(xiàn)5-HTTLPR基因與壓力的交互作用在男性和女性群體中呈相反的作用模式。

3 抑郁遺傳基礎(chǔ)性別差異的原因

雖然尚未有研究對(duì)抑郁遺傳基礎(chǔ)性別差異的原因進(jìn)行系統(tǒng)的分析總結(jié)，但綜述既有文獻(xiàn)資料可以發(fā)現(xiàn)，抑郁遺傳基礎(chǔ)的性別差異可能與性激素、個(gè)體對(duì)不同類(lèi)型環(huán)境的敏感性以及中間表型有關(guān)。

3.1 性激素

性激素可能通過(guò)以下幾個(gè)途徑影響抑郁遺傳基礎(chǔ)的性別差異。首先，性激素直接調(diào)節(jié)基因與抑郁相關(guān)生理反應(yīng)間的關(guān)系。Josephs等（2012、以成人為被試通過(guò)3種壓力反應(yīng)實(shí)驗(yàn)（研究1：通過(guò)社會(huì)排斥誘發(fā)地位威脅，研究2：認(rèn)知失敗，研究3：身體勝任力）考察了5-HTTLPR基因與素對(duì)皮質(zhì)醇水平的交互作用，研究結(jié)果均發(fā)現(xiàn)在素水平較高時(shí)，攜帶5-HTTLPR S等位基因的個(gè)體的皮質(zhì)醇水平較高，而攜帶LL基因型的個(gè)體皮質(zhì)醇水平較低，但當(dāng)素水平較低時(shí)，兩種基因型的個(gè)體皮質(zhì)醇水平相差不大甚至攜帶LL基因型的個(gè)體皮質(zhì)醇水平更高，這一結(jié)果表明5-HTTLPR基因與皮質(zhì)醇反應(yīng)的關(guān)系受到素的調(diào)節(jié)，而已有研究顯示重性抑郁患者的皮質(zhì)醇水平較高（Maes，Jacobs，Suy，Minner，&Raus，1989），這提示我們性激素可能通過(guò)調(diào)節(jié)遺傳基因與抑郁間的關(guān)聯(lián)，進(jìn)而影響抑郁遺傳基礎(chǔ)的性別差異，因此有必要進(jìn)一步探索性激素對(duì)基因～抑郁關(guān)聯(lián)的影響。

其次，性激素影響抑郁相關(guān)基因的表達(dá)。研究發(fā)現(xiàn)雌激素可以改變對(duì)5-羥色胺（serotonin，5-HT）神經(jīng)遞質(zhì)有重要作用的基因的表達(dá)，這種改變會(huì)增加5-HT的合成，減少5-HT的自我阻斷（Pecins-Thompson&Bethea，1998；Pecins-Thompson，Brown，&Bethea，1998）。Gundlah等人通過(guò)對(duì)切除卵巢的恒河猴進(jìn)行雌性激素治療（注射雌激素）發(fā)現(xiàn)。雌激素的增加會(huì)降低中縫核及下丘腦中MAOA基因的表達(dá)（Gundlah，Lu，&Bethea，2002），而有研究指出5-HT水平較低的人群更容易產(chǎn)生抑郁（Priess-Groben&Hyde，2013），因而，受雌激素調(diào)節(jié)的MAOA基因轉(zhuǎn)錄減少，會(huì)增加突觸間隙中5-HT水平，進(jìn)而影響個(gè)體抑郁的發(fā)生與發(fā)展。

第三，雌激素直接影響5.羥色胺系統(tǒng)的功能。研究者從不同的方面考察了雌激素對(duì)5-羥色胺系統(tǒng)功能的影響。首先，雌激素可以影響中腦和下丘腦5-羥色胺受體水平（Beyer et al.，2003；Zhou，Cunningham，&Thomas，2002）。與此一致，Chakravorty和Halbreich（1997）的研究也發(fā)現(xiàn)雌激素可以調(diào)節(jié)5-HT1受體和5-HT2受體，減少單胺氧化酶（monoamine oxidase，MAO）活性。其次，雌激素可以增加5-HT的合成（Dickinson&Curzon，1986）。簡(jiǎn)言之，雌激素和其他性激素一樣作用于細(xì)胞內(nèi)的雌激素受體（Rubinow&Schmidt，2003），當(dāng)荷爾蒙與受體相結(jié)合時(shí)，調(diào)節(jié)編碼基因的轉(zhuǎn)錄，制造大量蛋白，而這些蛋白對(duì)合成五羥色胺來(lái)說(shuō)恰恰是必不可少的。最后，雌激素還能增強(qiáng)5-HT的活性。如Halbreich等人（1995）發(fā)現(xiàn)處于絕經(jīng)期的女性5-HT的活性顯著降低，而且更易產(chǎn)生情緒障礙，研究同時(shí)指出使用雌激素替代療法（注射雌激素）可以顯著減少抑郁的易感性并且增加了5-HT抗抑郁藥物的功效。換言之，雌激素在5-HT功能上的累積效應(yīng)就如同這一系統(tǒng)的激動(dòng)劑（agonist）（Halbreich，1997）。

值得指出的是，抑郁的性別差異通常出現(xiàn)在青春期，表現(xiàn)為青春期女孩的抑郁水平高于男孩（Uddin et al.，2011；Piccinelli&Wilknson，2000），但是這一時(shí)期女孩的雌激素是升高的，這與上述研究中提到的“低雌激素水平與抑郁有關(guān)”相矛盾。對(duì)此，一種可能的解釋是由于女性在青春期時(shí)雌激素迅速升高，導(dǎo)致雌激素內(nèi)穩(wěn)態(tài)（estrogenhomeostasis）紊亂，而這一紊亂會(huì)擾亂五羥色胺的合成過(guò)程并引緒障礙（Halbreich&Kahn，2001）。還有一種可能的解釋是性激素與抑郁的關(guān)系可能是非線(xiàn)性的。如一項(xiàng)男性研究指出素水平與抑郁癥的關(guān)系呈u型曲線(xiàn)，即素水平過(guò)高或者過(guò)低，個(gè)體的抑郁水平較高（Booth，Johnson，&Granger，1999）。

3.2 環(huán)境敏感性的性別差異

眾所周知，環(huán)境因素（如壓力性事件）是抑郁的重要預(yù)測(cè)源。如前所述，遺傳和環(huán)境對(duì)抑郁的交互作用存在性別差異，這既與特定遺傳基因?qū)尚源嬖诓煌绊懹嘘P(guān)，也可能與男女對(duì)環(huán)境的敏感性不同有關(guān)。一項(xiàng)對(duì)346名青年人的研究發(fā)現(xiàn)，攜帶5-HTTLPR S等位基因的女性，其經(jīng)歷的慢性家庭壓力（如父母爭(zhēng)吵等）越多，患抑郁的可能性越大，但這一GXE效應(yīng)在男性中并不存在。換言之，相比男性，攜帶5-HTTLPR S等位基因的女性對(duì)家庭人際關(guān)系（如父母婚姻質(zhì)量和親子關(guān)系質(zhì)量）更為敏感（Hammen et al.，2010）。然而，Uddin等人（2010）以1084名青少年為被試的研究則發(fā)現(xiàn)，當(dāng)?shù)貐^(qū)貧困水平（該地區(qū)接受公共救助家庭的比例）較高時(shí)，攜帶5-HTTLPR SL基因型的男性患抑郁的風(fēng)險(xiǎn)較低，而這一GXE交互作用在女性群體中并不顯著，這與Hammen等人（2010）的研究結(jié)論截然相反。通過(guò)分析上述研究方法可以發(fā)現(xiàn)，兩項(xiàng)研究選擇的環(huán)境指標(biāo)存在差異，前者選擇的是家庭環(huán)境變量，而后者選擇的為社會(huì)環(huán)境變量。這些研究結(jié)果提示，男女對(duì)不同類(lèi)型的環(huán)境敏感性可能存在差異。Sjoberg等人（2006）的研究進(jìn)一步證明了該假設(shè)的合理性。他們采用不同類(lèi)型的環(huán)境指標(biāo)（創(chuàng)傷性家庭沖突、父母離異、居住地環(huán)境）發(fā)現(xiàn)，攜帶5-HTTLPR L等位基因的男性更容易受到公共居住環(huán)境和父母離異的消極影響，而攜帶5-HTTLPR S等位基因的女性則更容易受到傷害性家庭沖突（與父母或兄弟姐妹的關(guān)系等）的影響。

結(jié)合上述研究可推知，在宏觀社會(huì)環(huán)境水平（如社區(qū)環(huán)境）上，男性的敏感性要大于女性，但在人際關(guān)系及家庭水平的環(huán)境變量上，女性的敏感性要高于男性，但需要指出的是在離婚這一環(huán)境指標(biāo)上，男性的敏感性更高。雖然既有研究表明男女對(duì)不同類(lèi)型的環(huán)境敏感程度存在差異，但大多相關(guān)研究測(cè)量的是女性較為敏感的環(huán)境變量。此外，多數(shù)研究只考察了消極環(huán)境變量的作用，忽略了積極環(huán)境對(duì)個(gè)體抑郁性別差異的貢獻(xiàn)：而已有研究發(fā)現(xiàn)在社會(huì)支持水平較高的環(huán)境下.攜帶5-HTTLPR S等位基因的個(gè)體患抑郁的風(fēng)險(xiǎn)較低（Kaufman et al.，2004）。因而，有必要進(jìn)一步探究不同類(lèi)型和不同性質(zhì)的環(huán)境指標(biāo)對(duì)抑郁遺傳基礎(chǔ)性別差異的作用。

3.3 中間表型（intermediate phenotype）

中間表型（intermediate phenotype）是內(nèi)在的、可遺傳的、穩(wěn)定的個(gè)人特質(zhì)，如神經(jīng)生理結(jié)構(gòu)、生物化學(xué)成分、認(rèn)知等，與心理障礙、精神疾病等密切相關(guān)（Meyer-Lindenberg&Weinberger，2006）。正如心理學(xué)家Uher和McGuffin（2008）所言，中間表型比外在的心理癥狀更具有遺傳性，對(duì)中間表型的研究將會(huì)擴(kuò)展和深化已知的基因一環(huán)境交互作用。近期，已有研究表明基因?qū)σ钟舻男?yīng)可能受到注意偏好、消極推理風(fēng)格等中間表型的調(diào)節(jié)。如Gibb Uhrlass，Grassia，McGeary和Benas（2009）的一項(xiàng)研究發(fā)現(xiàn)，5-HTTLPR基因、兒童推理風(fēng)格和母親情緒性批評(píng)三者存在交互作用，具體表現(xiàn)為在具有消極推理風(fēng)格的兒童中，攜帶5-HTTLPR SS基因型的個(gè)體經(jīng)歷的母親情緒性批評(píng)越多，其抑郁水平越高。Gibb，Benas和Grassia（2009）的另一項(xiàng)研究還檢驗(yàn)了5-HTTLPR基因、母親抑郁病史與兒童注意偏好之間的聯(lián)系，結(jié)果也發(fā)現(xiàn)母親抑郁水平越高，攜帶5-HTTLPR S等位基因且同時(shí)表現(xiàn)出對(duì)悲傷面孔注意回避的兒童患抑郁的可能性更大。伴隨著功能性磁共振成像（fMRI）等神經(jīng)成像技術(shù)的廣泛應(yīng)用，研究者開(kāi)始考察腦功能、腦結(jié)構(gòu)等中間表型與抑郁遺傳基礎(chǔ)的關(guān)聯(lián)。由于杏仁核活性與個(gè)體抑郁有關(guān)（Lonsdorf et al.，2009），因此通過(guò)考察5-HTTLPR基因與杏仁核活性關(guān)聯(lián)的研究可以推知中間表型對(duì)遺傳效應(yīng)的調(diào)節(jié)作用。Lemogne等人（2011）的研究發(fā)現(xiàn)在不同的認(rèn)知評(píng)估任務(wù)中，5-HTTLPR基因與生活壓力對(duì)杏仁核活性的作用模式相反，具體表現(xiàn)為，在自我指向的認(rèn)知評(píng)估任務(wù)中，隨著生活壓力的增加，S等位基因攜帶者的杏仁核活性降低，而LL基因型攜帶者的杏仁核活性增強(qiáng)；但在情緒標(biāo)簽的認(rèn)知評(píng)估任務(wù)中，隨著生活壓力的增加，s等位基因攜帶者的杏仁核活性增強(qiáng)，LL基因型攜帶者的杏仁核活性則降低。此外，情緒系統(tǒng)中其他腦結(jié)構(gòu)與基因的關(guān)聯(lián)也備受關(guān)注（Cole et al.，2011；Andms et al.，2012；Drabant et al.，2012），如Drabant等人（2012）考察了大腦邊緣系統(tǒng)與5。HTTLPR基因的關(guān)聯(lián)，結(jié)果發(fā)現(xiàn)，與攜帶5-HTTLPR L等位基因的女性相比，攜帶sS基因型的女性在面臨壓力情境時(shí)表現(xiàn)出杏仁核、海馬、前腦島、丘腦、丘腦后結(jié)節(jié)、尾狀核、楔前葉、前扣帶回和內(nèi)側(cè)前額葉等腦區(qū)活性的顯著增強(qiáng)，而這些腦區(qū)活性的增強(qiáng)與焦慮抑郁密切相關(guān)。

上述研究表明遺傳效應(yīng)可能受到中間表型的調(diào)節(jié)，并且既有研究發(fā)現(xiàn)中間表型存在顯著的性別差異。如在青少年階段具有消極歸因風(fēng)格的女性要顯著多于男性（Hankin&Abramson，2002；Nolen-Hoeksema&Girgus，1994），并且在女性群體中消極歸因風(fēng)格與抑郁的聯(lián)系比在男性中更為密切（Gladstone，Kaslow，Seeley，&Lewinsohn，1997）。除了消極歸因風(fēng)格外，反思（rumination）傾向也是抑郁的特征之一（Nolen-Hoeksema，2000），一項(xiàng)關(guān)于成人的追蹤研究發(fā)現(xiàn)反思傾向存在顯著的性別差異，女性的反思傾向顯著高于男性（Nolen-Hoeksema，Larson，&Grayson，1999），這些研究結(jié)果提示，抑郁遺傳基礎(chǔ)的性別差異可能部分歸因于中間表型的性別差異。

4 小結(jié)與展望

抑郁具有復(fù)雜的遺傳基礎(chǔ)，不論是遺傳直接效應(yīng)還是遺傳一環(huán)境的交互作用均存在顯著的性別差異，盡管一些具體結(jié)論還存在分歧。本文通過(guò)綜述已有文獻(xiàn)，從性激素、環(huán)境敏感性及個(gè)體中間表型三方面討論了抑郁遺傳基礎(chǔ)性別差異的可能原因。基于以上分析，我們認(rèn)為未來(lái)研究應(yīng)該更加關(guān)注如下問(wèn)題：

（1）采用多基因一環(huán)境設(shè)計(jì)考察抑郁遺傳基礎(chǔ)的性別差異。

由前可知，多數(shù)研究采用的是單基因一環(huán)境交互作用的研究范式，即使有的研究（Eley et al.，2004；Nyman et al.，201 1）同時(shí)考察了多種基因，也僅僅是分析單個(gè)基因與環(huán)境對(duì)抑郁的影響，并沒(méi)有考察多種基因的交互效應(yīng)。然而，神經(jīng)遞質(zhì)之間的功能關(guān)系十分復(fù)雜，一種遞質(zhì)功能紊亂可能引起另外一種或幾種遞質(zhì)的功能失衡，從而導(dǎo)致一定的病理生理現(xiàn)象（王美萍，張文新，2010）。不同基因間存在交互效應(yīng)，如Kaufman等人（2006）的一項(xiàng)研究就發(fā)現(xiàn)BDNF（brain derived neurophicfactor，腦源性神機(jī)更營(yíng)養(yǎng)因子）和5-HTTLPR基因?qū)€(gè)體抑郁存在交互效應(yīng)。如前所述多基因研究與單基因研究的結(jié)果也往往不同，因此未來(lái)研究應(yīng)盡可能采用多基因一環(huán)境設(shè)計(jì)更深入地考察抑郁的遺傳基礎(chǔ)及其性別差異。

（2）考察不同類(lèi)型和性質(zhì)的環(huán)境與遺傳基因交互影響抑郁的性別差異。

如前所述，抑郁遺傳基礎(chǔ)的性別差異可能是個(gè)體對(duì)不同類(lèi)型的環(huán)境的敏感性存在差異造成的，多數(shù)研究并沒(méi)有給男性敏感的環(huán)境變量以足夠的重視，因此未來(lái)研究應(yīng)同時(shí)采用男性和女性的敏感環(huán)境因素，考察其在抑郁遺傳基礎(chǔ)中的效應(yīng)。此外，現(xiàn)有抑郁的分子遺傳學(xué)研究的理論基礎(chǔ)多是“素質(zhì)一壓力模型”（diathesis-stress model），由于該模型認(rèn)為，當(dāng)個(gè)體處于應(yīng)激或高壓狀態(tài)時(shí)，具有某種不良遺傳素質(zhì)的個(gè)體更容易發(fā)生心理與行為問(wèn)題，因而以該模型為理論基礎(chǔ)的研究多以壓力性生活事件等消極環(huán)境為指標(biāo)來(lái)考察抑郁的GxE效應(yīng)（Aslund et al.，2009；Caspi et al.，2003；Beach et al.，2010）。然而，新近興起的理論模型——“不同易感性模型”（differential susceptibilitymodel）明確提出并證明，某些基因型的個(gè)體也更容易受到積極成長(zhǎng)環(huán)境的影響而表現(xiàn)良好或優(yōu)秀（Belsky&Pluess，2009；Ellis，Boyce，Belsky，Bakermans-Kranenburg，&van Ijzendoom，2011）。因此，現(xiàn)有以“素質(zhì)一壓力模型”為理論基礎(chǔ)的研究未能揭示GxE交互作用的多種可能方式，攜帶不同基因型個(gè)體對(duì)積極環(huán)境的敏感性是否存在性別差異也是未來(lái)研究需要進(jìn)一步重點(diǎn)考察的內(nèi)容。

（3）抑郁遺傳基礎(chǔ)的性別差異的發(fā)展變化。

篇(3)

[關(guān)鍵詞] 馬方綜合征；分子遺傳學(xué)；基因檢測(cè)；研究進(jìn)展

[中圖分類(lèi)號(hào)] R596 [文獻(xiàn)標(biāo)識(shí)碼] A [文章編號(hào)] 1674-4721（2016）04（c）-0015-04

Recent molecular genetics research progress in Marfan syndrome

LI Bao-zhu SHU Xiao-rong CHEN Ren-hua WANG Jing-feng

Department of Cardiology，Sun Yat-Sen Memorial Hospital of Sun Yat-Sen University，Guangzhou 510120，China

[Abstract] Marfan syndrome（MFS） is an autosomal dominantly inherited connective tissue disorder characterized by ocular，skeletal manifestations and cardiovascular.The severe cardiovascular complications are the main lethal factors in patients with MFS.The study found that original fibrin（FBN） and transforming growth factor beta receptor（TGFBR） gene families are the main mutations in MFS.This paper reviews the main mutant genes，detection methods of mutation，correlation of genotype and phenotype，diagnosis and therapy of MFS in the future.

[Key words] Marfan syndrome；Molecular genetics；Gene detection；Research progress

馬方綜合征（Marfan syndrome，MFS）亦稱(chēng)為先天性中胚層發(fā)育不良、蜘蛛指征、肢體細(xì)長(zhǎng)癥、Marchesani綜合征，是一種以結(jié)締組織為基本缺陷的遺傳性疾病，具有基因多態(tài)性和多種臨床表征，發(fā)病率為0.2‰～0.3‰。MFS主要表現(xiàn)為周?chē)Y(jié)締組織營(yíng)養(yǎng)不良、內(nèi)眼疾病、骨骼異常和心血管異常[1]，病變有時(shí)也累及皮膚、肺部及硬腦脊膜等器官[2-5]，癥狀主要有骨骼過(guò)長(zhǎng)，晶狀體異位，主動(dòng)脈瓣反流和較嚴(yán)重的新生兒馬方綜合征等?，F(xiàn)就MFS的突變基因家族、突變基因的檢測(cè)方法、基因型與表型的相關(guān)性及后續(xù)展望作如下綜述。

1 突變基因家族

現(xiàn)如今已發(fā)現(xiàn)8種涉及MFS的基因，共3843種基因突變體（表1）。目前，研究最多的和引起MFS發(fā)病的主要突變基因家族是原纖維蛋白（the original fibrin，F(xiàn)BN）基因家族和轉(zhuǎn)化生長(zhǎng)因子β受體（transforming growth factor beta receptor，TGFBR）基因家族。

1.1 FBN基因家族與MFS

1986年，Sakai等[6-7]發(fā)現(xiàn)一種作為微纖維蛋白重要組成部分的細(xì)胞外基質(zhì)糖蛋白，將其命名為FBN。其在細(xì)胞外基質(zhì)以聚合體形式形成微纖維蛋白，存在于骨骼、眼睛、血管壁等人體彈性和非彈性組織中。1990年，Hollister等[8]通過(guò)FBN單克隆抗體，發(fā)現(xiàn)了MFS患者微纖維蛋白系統(tǒng)的異常。1991年，Magenis等[9]應(yīng)用原位雜交技術(shù)，成功定位并克隆了FBN基因，并首次檢測(cè)到2例MFS患者的原纖維蛋白基因1（the original fibrin 1，F(xiàn)BN1）基因突變。

MFS患者常伴有彈性組織中無(wú)定形基質(zhì)聚集和彈性纖維斷裂現(xiàn)象，研究發(fā)現(xiàn)，基質(zhì)原纖維蛋白-1（fibrillin-1，F(xiàn)BN-1）是參與這一發(fā)病機(jī)制的重要因素[6]，F(xiàn)BN1是最早發(fā)現(xiàn)、最常見(jiàn)且突變體最多的MFS致病基因。FBN1位于15號(hào)染色體長(zhǎng)臂（15q15-q21.1），含有65個(gè)外顯子，長(zhǎng)230 kb，轉(zhuǎn)錄大小為10 kb的mRNA，翻譯為2871個(gè)氨基酸的蛋白質(zhì)（表2）[9]。

表2 FBN1基因的突變類(lèi)型及數(shù)量

目前為止，已發(fā)現(xiàn)FBN1基因突變3077種，記錄于FBN1 mutations databate（http：//umd.be/FBN1/）。FBN1突變可發(fā)生于基因的任何區(qū)域，無(wú)明顯突變熱點(diǎn)，只有約12%的突變基因有可重現(xiàn)性，由此給基因篩查突變?cè)黾恿穗y度[10]。基因分為編碼區(qū)和非編碼區(qū)，F(xiàn)BN1基因編碼區(qū)突變約占總突變的80%，非編碼區(qū)突變約占總突變的20%。常見(jiàn)編碼區(qū)突變有移碼突變、錯(cuò)義突變和無(wú)義突變，移碼突變和錯(cuò)義突變約占編碼突變的80%，無(wú)義突變約占編碼突變的20%。無(wú)義突變導(dǎo)致的終止密碼子的提前出現(xiàn)，使得突變轉(zhuǎn)錄子被一種RNA監(jiān)視機(jī)制所降解，進(jìn)而導(dǎo)致翻譯的蛋白量?jī)H為正常的50%，且翻譯所得異常蛋白單體干擾正常蛋白單體的聚合[11-12]。這些無(wú)義突變可以導(dǎo)致MASS癥狀，包括近視、二尖瓣脫垂、主動(dòng)脈根部膨大、骨骼皮膚異常等[13]。非編碼區(qū)突變主要發(fā)生在剪接位點(diǎn)，保守區(qū)剪接位點(diǎn)突變約占20%。剪接位點(diǎn)突變易引起內(nèi)含子內(nèi)假外顯子的出現(xiàn)、內(nèi)含子保留、隱蔽剪接位點(diǎn)激活和外顯子跳躍等剪接錯(cuò)誤，蛋白結(jié)構(gòu)域的錯(cuò)誤和缺失會(huì)導(dǎo)致嚴(yán)重的臨床病癥出現(xiàn)[14]。

FBN1突變雖然沒(méi)有區(qū)域特異性，但外顯子57和65發(fā)生突變較少，外顯子13、26和27發(fā)生突變較多[15]。FBN1基因突變最常見(jiàn)的類(lèi)型是點(diǎn)突變，約占所有突變的73%，其中，錯(cuò)義突變約占59%，無(wú)義突變約占14%。FBN1的突變可引起多組織器官的病變，如心血管、顱面部、中樞神經(jīng)系統(tǒng)、肺部、眼部、骨骼和皮膚等。

1.2 TGFBR基因家族與MFS

轉(zhuǎn)化生長(zhǎng)因子-β（transforming growth factor-β，TGF-β）家族介導(dǎo)的信息傳遞控制著細(xì)胞繁殖、分化和凋亡等多種程序。2004年，一個(gè)具有與MFS部分相似臨床癥狀的患者，在排除FBN1和FBN2基因變異后，發(fā)現(xiàn)其家系中編碼轉(zhuǎn)化生長(zhǎng)因子β受體2（transforming growth factor β receptor 2，TGFBR2）的基因染色體發(fā)生斷裂[16]。具有與MFS相似的骨骼和心血管表現(xiàn)，且TGFBR基因家族發(fā)生突變的綜合征被稱(chēng)為MFS 2型[17]。此類(lèi)MFS具有與細(xì)胞外基質(zhì)TGF-β信息傳遞相關(guān)的結(jié)締組織疾病，從而導(dǎo)致致命的主動(dòng)脈并發(fā)癥。通過(guò)新型藥物對(duì)MFS患者TGF-β信息傳遞功能進(jìn)行適當(dāng)調(diào)整，也許可以維持患者的健康心血管狀態(tài)或者延遲致命病變[18-19]。

2 突變基因的檢測(cè)方法

MFS患者癥狀表現(xiàn)呈多樣性，主要表現(xiàn)為晶狀體異位、骨骼過(guò)長(zhǎng)、主動(dòng)脈瓣反流等。目前，MFS的臨床診斷依然主要依據(jù)1996年制定的Ghent診斷標(biāo)準(zhǔn)，該診斷包括對(duì)骨骼、眼部和心血管三個(gè)主要系統(tǒng)的診斷以及皮膚、肺和硬腦脊膜等次要系統(tǒng)的診斷。由于MFS發(fā)病癥狀與年齡密切相關(guān)，有些患者嬰兒和（或）兒童時(shí)期并未表現(xiàn)出癥狀，且很多患者并不符合診斷標(biāo)準(zhǔn)，因此，MFS基因診斷在輔助臨床診斷方面起到至關(guān)重要的作用。MFS檢出率主要受其臨床診斷正確性、基因突變類(lèi)型、臨床基因檢測(cè)方法和水平的影響。臨床基因檢測(cè)MFS時(shí)，通常檢測(cè)FBN1基因序列的突變情況，MFS患者FBN1基因突變檢出率占73%～90%。

目前，突變基因的常用檢測(cè)方法有變性高效液相色譜分析（denaturing high performance liquid chromatograph，DHPLC）、變性梯度凝膠電泳（denaturing gradi-ent gel electrophoresis，DGGE）、限制性片段長(zhǎng)度多態(tài)性分析（restriction fragment length polymorphism，RFLP）、構(gòu)象敏感凝膠電泳（conformation sensitive gel electrophoresis，CSGE）、單鏈構(gòu)象多態(tài)性分析（single-strand conformation polymorphism，SSCP）、高分辨率溶解曲線(xiàn)（high resolution melting cure，HRM）、多重連接探針擴(kuò)增技術(shù)（multiplex ligation-dependent probe amplification，MLPA）和直接測(cè)序等。

DHPLC檢測(cè)具有自動(dòng)化、高通量、高靈敏度、高特異性、檢測(cè)速度快和價(jià)格低廉等特點(diǎn)，適用于基因突變的大規(guī)模篩查，檢測(cè)未知單核苷酸多態(tài)性（single nucleotide polymorphism，SNP）可達(dá)到95%以上。DGGE法檢測(cè)對(duì)各種突變特別是點(diǎn)突變較敏感，檢測(cè)時(shí)無(wú)需標(biāo)記，并且?guī)缀蹩梢詸z測(cè)出所有突變，但無(wú)法確定突變位置，DN段大小限制在100～500 bp，需要專(zhuān)門(mén)設(shè)備檢測(cè)且需要計(jì)算機(jī)對(duì)序列進(jìn)行分析。RFLP法可用于證實(shí)患者的突變位點(diǎn)，為產(chǎn)前診斷提供確切診斷依據(jù)。DGGE、RFLP、CSGE和SSCP等方法的基因突變檢出率為60%～90%，且檢測(cè)過(guò)程相對(duì)繁瑣。HRM檢測(cè)無(wú)需基因序列特異性探針，不受堿基位點(diǎn)的局限，可以同時(shí)檢出已知或未知突變與SNP，靈敏度和精確度高達(dá)100%。但是HRM需專(zhuān)業(yè)儀器，技術(shù)要求高，反應(yīng)條件摸索費(fèi)時(shí)費(fèi)力。MLPA法可以用于拷貝數(shù)異常的檢測(cè)。直接測(cè)序法價(jià)格相對(duì)較貴，不適合大樣本基因突變篩查，但可以確定突變基因位點(diǎn)和類(lèi)型，是突變檢測(cè)的金標(biāo)準(zhǔn)。

基因cDNA序列篩查突變基因，不僅可以檢測(cè)整個(gè)編碼區(qū)基因突變，還可以檢測(cè)基因剪接位點(diǎn)的突變。cDNA篩查方法檢測(cè)FBN1基因突變的檢出率達(dá)90%。應(yīng)用CSGE、DHPLC和直接測(cè)序等方法不僅可以檢測(cè)基因組DNA（genomic DNA，gDNA）中的突變基因，還可以檢測(cè)導(dǎo)致RNA快速降解的基因。gDNA篩查方法檢測(cè)FBN1基因突變的檢出率達(dá)70%～93%[15]。MFS基因突變體具有多樣性，作為常規(guī)檢測(cè)MFS的FBN1基因外顯子多、基因大、沒(méi)有突變熱點(diǎn)，給突變篩查帶來(lái)難度，且突變篩查可能存在假陽(yáng)性[20-21]。

3 基因型與表型的相關(guān)性

由FBN1基因突變與心血管表型特征相關(guān)性可知，F(xiàn)BN1基因突變主要引起主動(dòng)脈和二尖瓣病變，如主動(dòng)脈擴(kuò)張、主動(dòng)脈夾層、主動(dòng)脈閉鎖不全、二尖瓣反流和二尖瓣脫垂等。而FBN1等位基因的完全缺失并不預(yù)示著溫和表型的出現(xiàn)，且單倍基因劑量不足也可導(dǎo)致典型MFS表型[22]。研究表明，MFS患者的預(yù)后取決于疾病的臨床表現(xiàn)和治療，而不是簡(jiǎn)單地取決于TGFBR2突變的存在與否[23]。TGFBR2基因發(fā)生突變的MFS患者臨床癥狀表現(xiàn)傾向于肢體細(xì)長(zhǎng)和具有心血管疾病，但沒(méi)有眼部病癥[17]。MFS表現(xiàn)型復(fù)雜多變，即使同一家系同一等位基因的突變，也會(huì)出現(xiàn)嚴(yán)重程度不同的表型，因此，到目前為止，通過(guò)某一特定突變基因推測(cè)其表型還不可能。由此可見(jiàn)，除了突變基因，MFS患者的表型還可能受環(huán)境等其他因素的影響。

4 MFS的主要致死病變及新生兒MFS

患者的致死病變主要在心血管系統(tǒng)，且死亡年齡與心血管病變程度有關(guān)。MFS的心血管疾病病癥主要表現(xiàn)為二尖瓣脫垂、二尖瓣反流、主動(dòng)脈根部擴(kuò)張和主動(dòng)脈瓣反流等，主要危及生命的心血管并發(fā)癥是主動(dòng)脈和主動(dòng)脈夾層動(dòng)脈瘤，約1/3的MFS患者有二尖瓣脫垂和（或）主動(dòng)脈根部擴(kuò)張的并發(fā)癥[24-26]。若不提前干預(yù)治療，病程發(fā)展快且易危及生命。

新生兒MFS病癥往往表現(xiàn)最嚴(yán)重，主要包括指細(xì)長(zhǎng)、手指屈曲性痙攣、胸部畸形、早衰面容、心臟瓣膜反流和鄰近主動(dòng)脈擴(kuò)張等，易導(dǎo)致新生兒因心力衰竭致死[27-28]。FBN1基因24～32外顯子突變被認(rèn)為是導(dǎo)致新生兒MFS的主要突變基因[29]。MFS患者有正常的生育能力，因此，對(duì)家族遺傳性MFS患者及家系成員進(jìn)行基因檢測(cè)，確定突變基因位點(diǎn)，對(duì)于指導(dǎo)患者及其家屬婚育和對(duì)其后代進(jìn)行產(chǎn)前診斷具有十分重要的意義。

5 展望

MFS的發(fā)病機(jī)制尚未清晰，其基因型和表型之間的差異表明環(huán)境等因素可能影響其表型?；蚪M學(xué)、后基因組學(xué)、蛋白質(zhì)組學(xué)和環(huán)境基因組學(xué)的研究表明，大多數(shù)疾病由基因突變和環(huán)境因素共同影響所致。因此，通過(guò)分子生物學(xué)、遺傳學(xué)和生物信息學(xué)等技術(shù)的應(yīng)用，從基因、蛋白、細(xì)胞、組織、器官、家系和環(huán)境等方面進(jìn)行研究，利于進(jìn)一步確定MFS的發(fā)病機(jī)制和遺傳特征。對(duì)MFS先證者家屬進(jìn)行突變基因單倍型分析和基因檢測(cè)，提前對(duì)MFS患者進(jìn)行干預(yù)治療，不僅可以進(jìn)行提前診斷、減緩病程發(fā)展，還可以為后續(xù)基因治療、藥物靶點(diǎn)治療和組織工程修復(fù)等奠定研究基礎(chǔ)，為臨床新藥應(yīng)用、生物療法和基因療法等提供科學(xué)依據(jù)。

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篇(4)

【關(guān)鍵詞】 精神分裂癥；強(qiáng)迫癥狀；病因?qū)W；臨床表現(xiàn)

近10年來(lái)，國(guó)內(nèi)外對(duì)精神分裂癥患者強(qiáng)迫癥狀的研究較多，為了解其系統(tǒng)研究的現(xiàn)狀，作者對(duì)其發(fā)生率、病因?qū)W、臨床表現(xiàn)及治療進(jìn)行了簡(jiǎn)要綜述。

1 OCSS的概念

Obsessive是指反復(fù)出現(xiàn)的觀點(diǎn)、思想、沖動(dòng)、意象；Compulsive是指反復(fù)出現(xiàn)的、有目的的、有意識(shí)的動(dòng)作行為。在美國(guó)的精神病診斷系統(tǒng)中將Obsessive和Compulsive統(tǒng)稱(chēng)為強(qiáng)迫癥狀（OCS）。OCS在強(qiáng)迫癥（OCD）及精神分裂癥、抑郁癥、焦慮癥等疾病中的發(fā)生率較高。本文主要介紹精神分裂癥的強(qiáng)迫癥狀（obsessivecompulsive symptoms in schizophrenia， OCSS）。

2 OCSS的發(fā)生率

國(guó)內(nèi)OCSS的發(fā)生率為1.7%～13.2%。唐瑞春［1］報(bào)道3595例住院精神分裂癥患者中61例（1.7%）有強(qiáng)迫癥狀；劉建勛等［2］報(bào)道3.9%的精神分裂癥患者有強(qiáng)迫癥狀；李曉菊［3］報(bào)道5.3%的住院精神分裂癥患者有強(qiáng)迫癥狀；劉紅等［4］發(fā)現(xiàn)13.2%的兒童精神分裂癥患者有明顯的強(qiáng)迫癥狀；國(guó)外報(bào)道［5］ OCSS的發(fā)生率為13%～40%。說(shuō)明強(qiáng)迫癥狀是精神分裂癥的常見(jiàn)癥狀之一。

3 OCSS的可能病因?qū)W

3.1 強(qiáng)迫癥狀與腦結(jié)構(gòu)異常改變 早在1992年YaLe大學(xué)的Woods［6］對(duì)以強(qiáng)迫癥狀為主要表現(xiàn)的精神分裂癥患者進(jìn)行的大腦血流影響學(xué)研究發(fā)現(xiàn)，患者的大腦基底節(jié)前扣帶回、前額葉皮質(zhì)的結(jié)構(gòu)和功能異常。1999年美國(guó)加洲San Tose腦研究中心的Joseph［7］把有強(qiáng)迫癥狀的精神分裂癥和無(wú)強(qiáng)迫癥狀的精神分裂癥分成兩組，對(duì)照性的研究其腦結(jié)構(gòu)和腦功能，發(fā)現(xiàn)有強(qiáng)迫癥狀的精神分裂癥患者的腦結(jié)構(gòu)的改變明顯，其基底節(jié)、紋狀體、前額葉的功能明顯障礙。

3.2 強(qiáng)迫癥狀與高香草酸 1994年Oades［8］研究發(fā)現(xiàn)，以強(qiáng)迫癥狀為主要表現(xiàn)的精神分裂癥患者尿中高香草酸（HAV）的濃度增高。HAV為腦中多巴胺（DA）的代謝產(chǎn)物，HAV的濃度增高說(shuō)明腦中的DA濃度及活性增高。Oades同時(shí)還發(fā)現(xiàn)患者血清5羥色胺（5HT）的濃度明顯增高，說(shuō)明患者腦內(nèi)DA與5HT功能亢進(jìn)。1995年Toren P等［9］ 提出OCSS的產(chǎn)生可能與5HT功能低下或失調(diào)有關(guān)。2000年徐貴云等［10］提出OCSS的產(chǎn)生可能與5HT和DA功能失調(diào)有關(guān)。但是，OCSS與5HT和DA的確切關(guān)系，有待進(jìn)一步研究。

3.3 強(qiáng)迫癥狀與分子遺傳學(xué) 1999年Bengel［11］從分子遺傳學(xué)方面研究了強(qiáng)迫癥患者和正常對(duì)照組5HT轉(zhuǎn)運(yùn)子（5HTT）5′端調(diào)節(jié)區(qū)域多態(tài)性，結(jié)果發(fā)現(xiàn)強(qiáng)迫癥患者5HTT的等位基因I與對(duì)照組存在明顯差異（46.7%/32.3%，χ2=5.19，P

4 OCSS的臨床表現(xiàn)

OCSS的強(qiáng)迫思維內(nèi)容荒謬，這與精神分裂癥的病態(tài)思維相關(guān)?；颊邿o(wú)焦慮、痛苦及求治愿望，自知力不全。而強(qiáng)迫癥的強(qiáng)迫癥狀內(nèi)容接近現(xiàn)實(shí)，不荒謬，患者十分痛苦，自知力完整，治療要求迫切。下面，我們通過(guò)表1，表2來(lái)說(shuō)明OCSS表現(xiàn)。

表1 61例OCSS表現(xiàn)［1］（略）

5 OCSS的治療

近幾年的研究?jī)A向于應(yīng)用抗精神病藥物合并抗強(qiáng)迫癥藥物治療OCSS。其理由為抗強(qiáng)迫癥藥物可直接減輕強(qiáng)迫癥狀，同時(shí)可增強(qiáng)抗精神病藥物的血藥濃度［12］。Reznik I等［13］將30例存在OCSS的精神分裂癥患者隨機(jī)分為兩組，一組給予安定藥物加氟伏沙明，另一組給予安定類(lèi)藥物。治療8 w后氟伏沙明組PANSS總分減少34.3%，YBOCS評(píng)分減少29.4%，兩組療效比較差異有顯著性。徐貴云等［14］將75例合并OCSS的患者分為利培酮合并安慰劑組（對(duì)照組）與利培酮合并氯丙咪嗪組（實(shí)驗(yàn)組）進(jìn)行治療，發(fā)現(xiàn)對(duì)照組總有效率為82.9%，顯效率為68.6%；實(shí)驗(yàn)組總有效率為93.7%，顯效率為89.2%。兩組比較差異有顯著(P

對(duì)于藥物治療無(wú)效的強(qiáng)迫癥患者實(shí)施神經(jīng)外科治療可能更為有效。而內(nèi)囊毀損術(shù)治療難治性強(qiáng)迫癥已有30年的歷史，有報(bào)道顯示［16］，其總有效率可達(dá)55%～78%。內(nèi)囊毀損術(shù)主要是通過(guò)干擾額葉丘腦通路或破壞眶額皮質(zhì)，恢復(fù)眶額丘腦間連接系統(tǒng)、額葉尾狀核蒼白球丘腦系統(tǒng)之間的平衡而達(dá)到治療目的。那么是否可以應(yīng)用內(nèi)囊毀損術(shù)治療經(jīng)藥物治療無(wú)效的OCSS哪？

6 結(jié)語(yǔ)

OCSS在精神分裂癥中較常見(jiàn)，此類(lèi)患者的大腦基底節(jié)、紋狀體及前額葉的結(jié)構(gòu)與功能均有明顯障礙，其病理過(guò)程的產(chǎn)生可能與5HT及DA功能失調(diào)有關(guān)，但目前還不十分明確。那么是否可通過(guò)嘗試研究5HTT基因的異常來(lái)探索OCSS的發(fā)病機(jī)制哪？應(yīng)用抗精神病藥物合并氯丙咪嗪或SSRI類(lèi)抗抑郁劑治療效果較好，但對(duì)經(jīng)藥物治療無(wú)效的患者，是否可以嘗試神經(jīng)外科手段治療，還有待進(jìn)一步的探討。

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篇(5)

關(guān)鍵詞：人類(lèi)基因組 基因克隆 基因組學(xué) 結(jié)構(gòu)基因組 功能基因組

人類(lèi)基因組計(jì)劃（human genome project,HGP）是由美國(guó)科學(xué)家、諾貝爾獎(jiǎng)獲得者Renato dulbecco于1986年在雜志《Science》上發(fā)表的文章中率先提出的，旨在闡明人類(lèi)基因組脫氧核糖核酸（DNA）3×109核苷酸的序列，闡明所有人類(lèi)基因并確定其在染色體的位置，從而破譯人類(lèi)全部遺傳信息。美國(guó)于1990年正式啟動(dòng)人類(lèi)基因組計(jì)劃，估計(jì)到2003年完成人類(lèi)基因組全部序列測(cè)定。歐共體、日本、加拿大、巴西、印度、中國(guó)也相繼提出了各自的基因組研究計(jì)劃[1]。由于各國(guó)政府和科學(xué)家的共同努力，HGP目前已在為全球范圍的合作項(xiàng)目；隨著數(shù)理化、信息、材料等學(xué)科的滲透和工業(yè)化管理模式的引進(jìn)，HGP已真正成為生命科學(xué)領(lǐng)域的科學(xué)工程，基因組（genomics）作為一門(mén)新興學(xué)科也應(yīng)運(yùn)而生。

與此同時(shí)，科學(xué)界也在思索人類(lèi)基因組計(jì)劃完成后的下一步工作，因此就有了“后基因組計(jì)劃”（post-genome project）的提法。大多數(shù)科學(xué)家認(rèn)為原定于2003年所完成的人類(lèi)基因組計(jì)劃只是一個(gè)以測(cè)序?yàn)橹鞯慕Y(jié)構(gòu)基因組學(xué)（structural genomics）研究，而所謂的“后基因組計(jì)劃”應(yīng)該是對(duì)基因功能的研究，即所謂的功能基因組學(xué)（functional genomics）。此外，一些新的概念如：“蛋白質(zhì)組（proteome）”、“環(huán)境基因組學(xué)（environmental genomics）”和“腫瘤基因組解剖學(xué)計(jì)劃（cancer genome anatomy project,CGAP）”等等也在不斷向外延伸。

一、結(jié)構(gòu)基因組學(xué)

（一）人類(lèi)基因組作圖

人類(lèi)基因組作圖根據(jù)使用的標(biāo)記和手段不同，初期的作圖有二種：一是通過(guò)計(jì)算連鎖的遺傳標(biāo)記之間重組頻率而確定它們相對(duì)距離的遺傳連鎖圖，一般用厘摩（cM）來(lái)表示；二是確定各遺傳標(biāo)記之間物理距離的物理圖，一般用堿基（bp）或千堿基（kb）或兆堿基（Mb）來(lái)表示。1cM的遺傳距離大致上相當(dāng)于1Mb的物理距離。隨著研究工作的進(jìn)展，遺傳圖和物理圖逐漸發(fā)生整合，在此基礎(chǔ)上大量引入基因標(biāo)記，從而形成了新一代的轉(zhuǎn)錄圖[1]。

1.遺傳連鎖圖 遺傳連鎖圖（genetic map）繪制需要遺傳標(biāo)記，早期的遺傳標(biāo)記主要為生化標(biāo)記，20世紀(jì)80年代中期以限制性片段長(zhǎng)度多態(tài)性（RFLP）、串聯(lián)重復(fù)序列拷貝多態(tài)性和小衛(wèi)星重復(fù)順序等遺傳標(biāo)記為主，這類(lèi)標(biāo)記的數(shù)量較少，信息也較低；20世紀(jì)80年代后期發(fā)展的短串聯(lián)重復(fù)序列（short tandem repeat,STR）也稱(chēng)微衛(wèi)星（microsatellite,MS）標(biāo)記，主要為二核苷酸重復(fù)序列，如：（CA）n，它們?cè)谌旧w上分布較均勻，信息含量明顯高于RFLP，因而成為遺傳連鎖分析極為有用的標(biāo)記；近年來(lái)，單個(gè)堿基的多態(tài)性（single nucleotide polymorphism,SNP）標(biāo)記又被大量使用，其意義已超出了遺傳作圖的范圍，而成為研究基因組多樣性和識(shí)別、定位疾病相關(guān)基因的一種新標(biāo)記。

2.物理圖 物理圖（physical map）包含了兩層意義，一是獲得分布于整個(gè)基因組的30000個(gè)序列標(biāo)簽位點(diǎn)（sequence tagged site,STS），這可使基因組每隔100kb距離就有一個(gè)標(biāo)記；二是在此基礎(chǔ)上構(gòu)建覆蓋每條染色體的大片段DNA克隆，如：酵母人工染色體（yeast ar tificial chromosome,YAC）或細(xì)菌人工染色體（bacterial artificial chromosome,BAC）、人工附加染色體（human artificial episomal chromosome,HAEC）和人工噬菌體染色體（P1 bacteriophage artificial chromosome,PAC）等連續(xù)克隆。這些圖譜的制作進(jìn)一步定位其它基因座提供了詳細(xì)的框架[2]。

3.轉(zhuǎn)錄圖 構(gòu)建轉(zhuǎn)錄圖的前提條件是獲得大量基因轉(zhuǎn)錄本即信使核糖核酸（mRNA）的序列，人類(lèi)基因組中的基因數(shù)目約在10萬(wàn)左右，構(gòu)建轉(zhuǎn)錄圖首先需要獲得人類(lèi)基因的表達(dá)序列標(biāo)簽（expressed sequence tag,EST），以此建立一張人類(lèi)的轉(zhuǎn)錄圖，并與遺傳圖的交叉參照。

4.DNA序列的生物信息學(xué) HGP一開(kāi)始就與信息高速公路和數(shù)據(jù)庫(kù)技術(shù)形成了同步發(fā)展。迄今，國(guó)際上四個(gè)大的生物信息中心即美國(guó)的國(guó)家生物技術(shù)信息中心（NCBI）、基因組序列數(shù)據(jù)庫(kù)（GSDB）、歐洲分子生物實(shí)驗(yàn)室（EMBL）和日本DNA數(shù)據(jù)庫(kù)（DDBJ）已經(jīng)建立和維持了源自數(shù)百種生物的互補(bǔ)DNA（cDNA）和基因組DNA序列的大型數(shù)據(jù)庫(kù)。這些中心和全球的基因組研究實(shí)驗(yàn)室通過(guò)網(wǎng)點(diǎn)、電子郵件或者直接與服務(wù)器和數(shù)據(jù)庫(kù)聯(lián)系而獲得的搜尋系統(tǒng)，使得研究者可以在多種不同的分析系統(tǒng)中對(duì)序列數(shù)據(jù)庫(kù)提出質(zhì)詢(xún)，這些分析包括基因的發(fā)現(xiàn)、蛋白質(zhì)模體的鑒別、調(diào)控元件的分析、重復(fù)序列的鑒別、相似性的分析、核苷酸組成的分析以及物種間的比較等。

（二）基因組的基本結(jié)構(gòu)和進(jìn)化

人類(lèi)基因組研究的目的，不僅為了單純地積累數(shù)據(jù)，而且要提示數(shù)據(jù)中所蘊(yùn)藏的內(nèi)在規(guī)律[3]，從而更好地認(rèn)識(shí)生命體。近年來(lái)，隨著模式生物體測(cè)序的相繼完成和人類(lèi)基因組測(cè)序速度的加快（到1999年12月已宣布完成人類(lèi)第22號(hào)染色體的完全測(cè)序），特別是生物信息所提供的強(qiáng)有力的分析和綜合手段，使人人能夠逐漸透過(guò)浩瀚的基因組序列信息，去探索一些更為本質(zhì)的問(wèn)題，如：基因組的復(fù)雜度與生物進(jìn)化、基因組編碼序列的結(jié)構(gòu)、基因和蛋白家族、基因家族的大小及其進(jìn)化。

（三）疾病的基因組學(xué)

HGP的直接始動(dòng)因素是要解決包括腫瘤在內(nèi)的人類(lèi)疾病的分子遺傳學(xué)問(wèn)題[4]，因此與人類(lèi)健康密切相關(guān)。另一方面，8000多種單基因遺傳病和多種大面積危害人群健康的多基因疾病（如：腫瘤、心血管病、代謝性疾病、神經(jīng)疾病、精神疾病、免疫性疾病）的致病基因和疾病相關(guān)基因占人類(lèi)基因組中相當(dāng)大的一部分。因此，疾病基因的定位、克隆和鑒定是HGP的核心部分。

20世紀(jì)90年代之前，絕大多數(shù)人類(lèi)遺傳性疾病的原發(fā)生化基礎(chǔ)尚不清楚，無(wú)法用表型-蛋白質(zhì)-基因的傳統(tǒng)途徑進(jìn)行研究。在HGP的遺傳和物理作圖帶動(dòng)下，出現(xiàn)了最初被稱(chēng)為“反求遺傳”、90年代初又改稱(chēng)為“定位克隆法”的全新思路。該思路的關(guān)鍵內(nèi)容是：應(yīng)用細(xì)胞遺傳學(xué)定位和家第連鎖分析方法，首先將疾病基因定位于染色體的特定位置，然后通過(guò)進(jìn)一步的遺傳和物理作圖，使相關(guān)區(qū)域壓縮至1Mb之內(nèi)，此時(shí)即可構(gòu)建YAC、BAC、PAC、HAEC或粘粒（comid）等克隆重疊樣，從中分離基因，并在正常人和患者的DNA中進(jìn)行結(jié)構(gòu)比較，最終識(shí)別出疾病基因。包括囊性纖維化、Huntington舞蹈病、遺傳性結(jié)腸癌、乳腺癌等一大批重要疾病的基因是通過(guò)“定位克隆”發(fā)現(xiàn)的，從而為這些疾病的基因診斷和未來(lái)的基因治療奠定了基礎(chǔ)。隨著人類(lèi)基因圖的日臻完善，一旦某個(gè)疾病位點(diǎn)被定位，即可從局部的基因圖中遴選出結(jié)構(gòu)、功能相關(guān)的基因進(jìn)行分析，將大大提高疾病基因發(fā)現(xiàn)的效率。

目前，人類(lèi)疾病的基因組學(xué)研究，已深入到多基因疾病這一難點(diǎn)。多基因疾病難以用一般的家系遺傳連鎖分析取得突破，需要在人群和遺傳標(biāo)記的選擇、數(shù)學(xué)模型的建立、統(tǒng)計(jì)方法的改進(jìn)等方面進(jìn)行不斷的探索。

二、功能基因組學(xué)

HGP當(dāng)前的整體發(fā)展使功能基因組學(xué)提到了議事日程[5]，出現(xiàn)了結(jié)構(gòu)和功能基因組學(xué)向功能基因組學(xué)過(guò)渡、轉(zhuǎn)化的過(guò)程。一般認(rèn)為，在功能基因的組研究中可能的核心科學(xué)問(wèn)題有基因組的多樣性和進(jìn)化規(guī)律；基因組的 表達(dá)及其調(diào)控；模式生物體基因組研究等。

（一）基因組多樣性

人類(lèi)是一個(gè)具有多樣性的群體，不不同群體和個(gè)體在生物學(xué)性狀以及在對(duì)疾病的易感性/抗性上的差別，反映了進(jìn)化過(guò)程中基因組與內(nèi)、外環(huán)境相互作用的結(jié)果。開(kāi)展人類(lèi)基因組多樣性的系統(tǒng)研究，無(wú)論是對(duì)于了解人類(lèi)的起源和進(jìn)化，還是對(duì)于醫(yī)學(xué)均會(huì)產(chǎn)生重大的影響。各種常見(jiàn)多因素疾病（如：高血壓、糖尿病和精神分裂癥等）相關(guān)基因的研究將成為功能基因組時(shí)代的研究熱點(diǎn)。除了利用多態(tài)性遺傳標(biāo)記進(jìn)行精細(xì)定位這一傳統(tǒng)途徑，也將采用基因組水平再測(cè)序的方法直接識(shí)別變異序列，即選取一定數(shù)量的受累和未受累個(gè)體，對(duì)所有疾病相關(guān)或候選基因的全序列（或其編碼區(qū)）進(jìn)行再測(cè)序，準(zhǔn)確定位其變異相關(guān)標(biāo)記位點(diǎn)。同樣，腫瘤研究也需要對(duì)腫瘤相關(guān)基因進(jìn)行大規(guī)模的再測(cè)序。

（二）識(shí)別人類(lèi)基因的共同變異

已知大多數(shù)人類(lèi)基因的等位基因數(shù)量是有限的，常僅有2～3種。形成這種遺傳多樣性局限性的原因，很有可能是因?yàn)楝F(xiàn)代人類(lèi)來(lái)源于一個(gè)相當(dāng)小的群體，這有助于揭開(kāi)許多疾病敏感性的奧秘。如：載脂蛋白E基因有三種主要變型（E2、E2和E4），可以解釋老年癡呆癥和心血管疾病的風(fēng)險(xiǎn)性；血管緊張素原轉(zhuǎn)換酶（ACE）與心血管疾病一定相關(guān)性；化學(xué)趨化因子受體CKR-5在一定程度上影響對(duì)人類(lèi)免疫缺陷病毒（HIV）的敏感性等。非編碼區(qū)對(duì)評(píng)價(jià)疾病風(fēng)險(xiǎn)也是重要的，精確定位非編碼區(qū)變異的方法可以是對(duì)調(diào)控區(qū)域變異的系統(tǒng)性篩查，也可利用精密遺傳圖在人類(lèi)群體中識(shí)別祖先染色體節(jié)段。

三、藥物基因組學(xué)

基因組多樣性也在一定程度上決定了人體對(duì)藥物的反應(yīng)，通過(guò)對(duì)影響藥物代謝或效應(yīng)通路有關(guān)基因的編碼序列的再測(cè)序，有可能提示個(gè)體對(duì)藥物反應(yīng)差異的遺傳學(xué)基礎(chǔ)，這就是“藥物基因組學(xué)”（pharmacogenomics）的主要內(nèi)容[6]；以此作為延伸，提示個(gè)體對(duì)環(huán)境反應(yīng)差異的遺傳學(xué)基礎(chǔ)的環(huán)境基因組學(xué)也已露端倪。

四、蛋白質(zhì)組學(xué)

蛋白質(zhì)組學(xué)是要從整體上研究蛋白質(zhì)及其修飾狀態(tài)。目前正在發(fā)展標(biāo)準(zhǔn)化和自動(dòng)化的二維蛋白質(zhì)凝膠電泳的工作體系，包括用一個(gè)自動(dòng)系統(tǒng)來(lái)提取人類(lèi)細(xì)胞的蛋白質(zhì)，繼而用色譜儀進(jìn)行部分分離，再用質(zhì)譜儀檢測(cè)二維修飾，如：磷酸化和糖基化。此外，也有人在設(shè)計(jì)和制作各種蛋白質(zhì)生物芯片；蛋白質(zhì)的另一個(gè)重要工作內(nèi)容是建立蛋白質(zhì)相互作用的系統(tǒng)目錄。生物大小即蛋白-蛋白和蛋白-核酸之間的互作構(gòu)成了生命活動(dòng)的基礎(chǔ)，這些互作有可能以通用的或特殊的“陷井”（如：酵母雙雜交系統(tǒng)）加以識(shí)別[7]。

總之，基因組學(xué)正方興未艾，其現(xiàn)實(shí)意義和深遠(yuǎn)意義已得到全體人類(lèi)的共識(shí)，預(yù)期在不遠(yuǎn)的將來(lái)，人類(lèi)基因組學(xué)將對(duì)人類(lèi)的健康、計(jì)劃生育、優(yōu)生優(yōu)育產(chǎn)生重大影響。

參考文獻(xiàn)

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關(guān)鍵詞基因治療;治療方式;發(fā)展前景

中圖分類(lèi)號(hào)r459.9文獻(xiàn)標(biāo)識(shí)碼a文章編號(hào) 1007-5739(2010)01-0025-01

美國(guó)是世界上最早開(kāi)展基因治療的國(guó)家,也是目前開(kāi)展基因治療最多的國(guó)家。我國(guó)在1991年7月開(kāi)始基因治療的臨床研究,最早的工作是對(duì)b型血友病的基因治療及利用抑癌基因?qū)Π┌Y的基因治療[1]?；蛑委熌壳爸饕糜谥委煂?duì)人類(lèi)健康威脅嚴(yán)重的疾病,包括遺傳病、惡性腫瘤、心血管疾病、感染性疾病等[2]。

1基因治療的方式

1.1體內(nèi)基因治療

體內(nèi)基因治療是指將具有治療功能的基因直接轉(zhuǎn)入病人的某一特定組織中。利用反轉(zhuǎn)錄病毒載體已成功地將真核基因轉(zhuǎn)入動(dòng)物細(xì)胞,但通過(guò)質(zhì)粒dna的直接操作,將更加省時(shí)而且產(chǎn)量較高;采用溫和病毒載體的體內(nèi)基因治療主要是通過(guò)腺病毒和單純皰疹病毒來(lái)完成的,即將載有矯正基因的載體直接注射入需要這些基因的組織。以腺病毒為載體的體內(nèi)療法在遺傳性疾病方面,目前主要見(jiàn)于囊性纖維變性的基因治療研究。多數(shù)研究表明,基因治療糾正了呼吸道上皮的氯離子轉(zhuǎn)運(yùn)缺陷,使跨上皮基礎(chǔ)電位下降,肺功能有所改善[3]。

1.2反義療法

反義療法主要是通過(guò)阻遏或降低目的基因的表達(dá)而達(dá)到治療的目的。反義療法是通過(guò)引入目的基因的rna的反義序列而達(dá)到上述目的。當(dāng)引入的反義rna與mrna相配比后,用于翻譯的mrna的量就大大減少,因而合成的蛋白的量也相應(yīng)大大減少。引入的反義序列也可能與基因組dna互補(bǔ)配對(duì),從而阻遏mrna的轉(zhuǎn)錄。這2種情況都會(huì)使細(xì)胞中靶基因編碼的蛋白合成大大減少,以達(dá)到基因治療的目的。

1.3通過(guò)核酶的基因治療

20世紀(jì)80年代初,美國(guó)科學(xué)家cech和altman發(fā)現(xiàn)了核酶,核酶是指由rna組成的酶,能夠序列特異性地抑制靶mrna。近年來(lái),核酶在抑制癌基因的表達(dá)[4]、增強(qiáng)腫瘤對(duì)藥物的敏感性及抑制腫瘤血管的生成等方面的應(yīng)用得到了廣泛的研究。

1.4自殺基因療法

自殺基因療法是惡性腫瘤基因治療領(lǐng)域最有希望的方法之一,已廣泛用于各種惡性腫瘤的基礎(chǔ)研究和臨床試驗(yàn)性治療。它是用藥物敏感基因轉(zhuǎn)染腫瘤細(xì)胞,其基因表達(dá)的產(chǎn)物可以將無(wú)毒性的藥物前體轉(zhuǎn)化為有毒性的藥物,影響細(xì)胞的dna合成,從而引起該腫瘤細(xì)胞的死亡。

2基因治療存在的問(wèn)題

2.1基因治療的社會(huì)和倫理問(wèn)題

基因治療不僅僅是一種醫(yī)療方法,它還涉及很多其他問(wèn)題。因?yàn)楫?dāng)人們?cè)噲D“糾正”人類(lèi)自身“不正?！钡幕驎r(shí),這種糾正的后果是無(wú)法預(yù)料的。由于人類(lèi)的遺傳信息非常復(fù)雜,轉(zhuǎn)基因也可能帶來(lái)不可預(yù)料的后果,沒(méi)有人能保證這種基因結(jié)構(gòu)的改變絕對(duì)不會(huì)造成人類(lèi)某一未知功能的缺失。另外,當(dāng)人們?cè)噲D把基因治療引入生殖細(xì)胞時(shí),又涉及后代基因結(jié)構(gòu)的改變問(wèn)題,且改變將直接影響這個(gè)“未來(lái)人”,這是一個(gè)很難解決的倫理問(wèn)題。

2.2基因治療的技術(shù)問(wèn)題

目前,基因治療的對(duì)象是單基因的缺陷,但許多疾病涉及多個(gè)基因之間復(fù)雜的調(diào)控和表達(dá)關(guān)系。對(duì)這類(lèi)疾病的基因治療難度很大,因?yàn)橄蚣?xì)胞中導(dǎo)入多個(gè)基因后,使幾個(gè)基因之間能保持正常的調(diào)控關(guān)系幾乎是不可能的。即使是單基因缺陷癥,使導(dǎo)入細(xì)胞的基因能正常表達(dá)也是一個(gè)較復(fù)雜的問(wèn)題。將基因?qū)爰?xì)胞后,其表達(dá)量的多少是直接影響能否達(dá)到治療的目的和有無(wú)副作用的關(guān)鍵。但這個(gè)問(wèn)題將會(huì)在人類(lèi)基因組計(jì)劃完成的基礎(chǔ)上,對(duì)人類(lèi)后基因組計(jì)劃的開(kāi)展,弄清了人類(lèi)基因之間復(fù)雜的調(diào)控聯(lián)系后而最終得到解決。只有這樣,才能在基因治療中盡量做到使導(dǎo)入的基因處于正確的調(diào)控下,取得治療效果,消除副作用。

3展望

以基因轉(zhuǎn)移為基礎(chǔ)的基因治療要在臨床上很好地應(yīng)用,還有待理論和各種技術(shù)的進(jìn)一步發(fā)展。過(guò)去20~30年基因治療的發(fā)展已取得了巨大成就,已被看成是對(duì)先天和后天基因疾病的潛在有效的治療方法,不過(guò)其依然存在缺少高效的傳遞系統(tǒng)、缺少持續(xù)穩(wěn)定的表達(dá)和宿主產(chǎn)生免疫反應(yīng)等問(wèn)題。今后基因治療研究將向2個(gè)方向發(fā)展:一是基礎(chǔ)研究更加深入,以解決在臨床應(yīng)用中遇到的一些困難及基因治療本身需要解決的一些難點(diǎn);二是臨床試用項(xiàng)目增多,實(shí)施方案更加優(yōu)化,判斷標(biāo)準(zhǔn)更加客觀,評(píng)價(jià)效果更加精確?？傊?隨著分子生物學(xué)、分子遺傳學(xué)以及臨床醫(yī)學(xué)的發(fā)展,基因治療也會(huì)不斷發(fā)展,日趨成熟,很多難題會(huì)得到解決,并在臨床上得到廣泛應(yīng)用。 編輯整理

4參考文獻(xiàn)

[1] 李立家,肖庚富.基因工程[m].北京:科學(xué)出版社,2004.

[2] anderson w.human genetherapy[j].nature,1998(392):25.

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關(guān)鍵詞：多囊卵巢綜合征；臨床研究；進(jìn)展

臨床婦科內(nèi)分泌疾病中，多囊卵巢綜合征（PCOS）較為常見(jiàn)，以持續(xù)無(wú)排卵和雄激素過(guò)多為主要特征，是一種以多種代謝異常、內(nèi)分泌紊亂為主的異質(zhì)性臨床綜合征，對(duì)患者的生命健康造成了嚴(yán)重影響[1]。PCOS治療主要依據(jù)病變程度、患者年齡及就診目的對(duì)治療措施進(jìn)行選擇，提倡系統(tǒng)性、個(gè)體化、綜合性的治療，并與預(yù)防相結(jié)合，以最大限度的改善預(yù)后。本文對(duì)相關(guān)研究及其臨床特點(diǎn)進(jìn)行分析，旨在為臨床治療方案的制定提供參考依據(jù)，現(xiàn)將相關(guān)內(nèi)容綜述如下[2]。

1 PCOS與遺傳的相關(guān)性

PCOS存在一定的家族聚集現(xiàn)象，故遺傳因素對(duì)之有一定的影響存在，在目前對(duì)PCOS研究的熱點(diǎn)內(nèi)容中，分子遺傳學(xué)為較重要的部分[3]。研究顯示，PCOS為共顯性遺傳常染色體，其遺學(xué)學(xué)基礎(chǔ)為家族聚集性[4]。PCOS可能由環(huán)境因素與致病基因相互作用導(dǎo)致，為多基因病，與多個(gè)基因突變密切相關(guān)。與PCOS發(fā)病存在關(guān)聯(lián)的候選基因中，有學(xué)者共提出37個(gè)，如相關(guān)甾體激素合成基因，包括性激素結(jié)合球蛋白基因、膽固醇側(cè)鏈解酶基因等。相關(guān)胰島素活性及其分泌的基因如胰島素受體基因、胰島素基因等[5]。

CYP11α基因于15號(hào)染色體上定位，以膽固醇側(cè)鏈裂解酶為編碼。對(duì)膽固醇有催化作用，使其旁鏈分裂轉(zhuǎn)化為孕烯醇酮，為與雄激素合成代謝有重要關(guān)系的酶。故在PCOS基因研究中，CYP11α在候選基因中占重要地位。CYP11α微衛(wèi)生多態(tài)性是重要的造成PCOS高雄激素血癥的相關(guān)遺傳因素，屬較為重要的遺傳易感位點(diǎn)，具有深入科研價(jià)值[6]。

PCOS的相關(guān)特征中，還包括高雄激素血征，SHBG調(diào)節(jié)雄二醇、睪酮對(duì)靶器官的作用。SHBG水平可受營(yíng)養(yǎng)、代謝、激素等多因素影響，為人類(lèi)性甾體激素血漿運(yùn)輸?shù)鞍?，由肝臟產(chǎn)生。與正常人SHBG比較，PCOS患者呈較低水平。SHBG是PCOS候選基因之一，其在PCOS患者中水平出現(xiàn)下降具有一定的遺傳學(xué)背景[7]。胰島素基因在染色體11p15.5上分布，其存在的可變數(shù)目串聯(lián)是造成PCOS特別是無(wú)排卵的患者主要的可疑性位點(diǎn)，在2型糖尿病及高胰島素血癥患者的發(fā)生機(jī)制中均有一定的作用產(chǎn)生。

在細(xì)胞水平上胰島素首先與受體結(jié)合發(fā)揮作用，胰島素受于細(xì)胞膜上，是一種膜蛋白，為四聯(lián)體，分別有2個(gè)α亞基及β亞基構(gòu)成。α亞級(jí)與胰島素結(jié)合，有配體結(jié)合的區(qū)域，于細(xì)胞外分布。β亞基含13個(gè)酪氨酸殘基，為跨膜結(jié)構(gòu)，具有酪氨酸激酶的活性。編碼胰島素受體基因?qū)κ荏w酪氨酸激酶的活性有著重要的決定作用。研究發(fā)現(xiàn)，位于17外顯子1058位點(diǎn)有體重指數(shù)（BMI）和TC等位基因多態(tài)性出現(xiàn)，故PCOS非肥胖者可依據(jù)此特點(diǎn)進(jìn)行診斷。

2 PCOS與IR相關(guān)性

臨床對(duì)IR在PCOS患者中存在已有共性研究，PCOS患者糖代謝異常中高胰島素血癥及IR為基本特征，有約63.4%的發(fā)生率[8]。肝臟清除胰島素的效果下降及周?chē)鶬R為IR發(fā)生的主要原因，周?chē)鶬R可能為變異的胰島素受體基因造成胰島素受體數(shù)目不同程度的減少，而高胰島素血癥為一種IR的代償性反應(yīng)[9]。在胰島素受體有缺陷情況存在的情況下，胰島素生長(zhǎng)因子受體與升高胰島素結(jié)合，對(duì)卵泡膜細(xì)胞進(jìn)行刺激，使雄激素分泌增多，對(duì)胰島素樣生長(zhǎng)因子結(jié)合蛋白及肝臟SHBG合成起到抑制作用，使游離IGF-1和有生物活性的雄激素增加。相關(guān)研究顯示，POCS異常與心血管疾病，肥胖均有一定相關(guān)性。

3 PCOS與脂肪細(xì)胞因子相關(guān)性

肥胖患者占PCOS總患者人數(shù)的50%，脂肪細(xì)胞因子在相關(guān)疾病的發(fā)生及肥胖中有著重要作用。脂肪細(xì)胞為較活躍的內(nèi)分泌代謝器官，是能量?jī)?chǔ)存場(chǎng)所，通過(guò)對(duì)各種脂肪細(xì)胞因子分泌，如脂聯(lián)素、瘦素等參與體內(nèi)能量平衡調(diào)節(jié)和復(fù)雜的代謝活動(dòng)，并在相關(guān)疾病和肥胖中存在。

3.1 瘦素相關(guān)特點(diǎn)分析 瘦素為脂肪細(xì)胞分泌的一種蛋白，在機(jī)體肥胖基因編碼中，其為氨基酸殘基，第146個(gè)，通過(guò)下丘腦受體對(duì)大腦機(jī)體脂肪狀態(tài)進(jìn)行通知，進(jìn)而達(dá)到對(duì)體重控制的效果。對(duì)外周和中樞均有調(diào)節(jié)作用[10]。外周組織和下丘腦均存在活性瘦素受體。除通過(guò)對(duì)下丘腦-卵巢軸、垂體功能對(duì)性激素的內(nèi)分泌和合成造成影響，還存在間接或直接的外周作用。卵泡液內(nèi)高濃度瘦素在外周對(duì)卵母細(xì)胞和卵泡的成熟進(jìn)行干擾，對(duì)排卵產(chǎn)生抑制。血中高濃度瘦素對(duì)顆粒細(xì)胞作用，對(duì)芳香化酶活性進(jìn)行抑制，對(duì)雄激素轉(zhuǎn)化為雌激素進(jìn)行阻止，增高血雄激素水平，最終發(fā)展至PCOS。PCOS患者體內(nèi)，瘦素的作用呈多樣且復(fù)雜性，即可在能量代謝途徑上作用，造成IR形成而誘導(dǎo)PCOS發(fā)生，也可對(duì)生殖系統(tǒng)直接作用對(duì)激素的代謝和合成進(jìn)行干擾，引起疾病發(fā)生。研究發(fā)現(xiàn)，血清瘦素水平在PCOS患者中通常為異常表現(xiàn)，故PCOS發(fā)病中瘦素通過(guò)對(duì)胰島素進(jìn)行調(diào)節(jié)而產(chǎn)生一定作用。故血清瘦素水平與PCOS的發(fā)生存在較大相關(guān)性，需對(duì)PCOS代謝異常中瘦素的特點(diǎn)進(jìn)一步研究，以為PCOS的臨床診治提供依據(jù)。

3.2 脂聯(lián)素（APN）分析 脂聯(lián)素為相對(duì)分子量為30000的蛋白，由脂肪組織特異性分泌，是最近發(fā)現(xiàn)的脂肪細(xì)胞因子。APN具有抗動(dòng)脈硬化、抗炎、調(diào)節(jié)糖代謝、改善IR增增加胰島素在外周組織的敏感性，其水平的減低與動(dòng)脈粥樣硬化、糖尿病、IR存在密切相關(guān)性[11-14]。通過(guò)對(duì)脂肪代謝產(chǎn)能進(jìn)行促進(jìn)，降低脂脈在體內(nèi)的含量，進(jìn)而減輕肝臟及血液中脂肪酸含量，降低血糖濃度，使胰島素的敏感性提高[15]。有學(xué)者研究顯示，PCOS患者中APN可能為發(fā)生2型糖尿病等并發(fā)癥遠(yuǎn)期特點(diǎn)的預(yù)測(cè)指標(biāo)，需加強(qiáng)PCOS低水平APN患者的隨訪(fǎng)，以對(duì)糖代謝異常進(jìn)行防治[16-18]。

4 PCOS與心理、精神的因素

PCOS的研究已向營(yíng)養(yǎng)、生化等多個(gè)領(lǐng)域涉及，但對(duì)心理學(xué)的相關(guān)研究較少，研究表明，PCOS患者對(duì)生活的滿(mǎn)意度較低，精神、心理因素對(duì)患者造成嚴(yán)重不利影響，是導(dǎo)致遠(yuǎn)期并發(fā)癥發(fā)生的重要因素[19-20]。心理、社會(huì)、精神對(duì)人體尤其是內(nèi)分泌系統(tǒng)有較大的影響，長(zhǎng)期恐懼憂(yōu)慮、精神緊張、精神壓抑、環(huán)境改變等會(huì)導(dǎo)致排卵異常和神經(jīng)內(nèi)分泌障礙，而目前，快節(jié)奏的生活方式使女性心理壓力更大，需加強(qiáng)心理因素引起PCOS的研究。

5 小結(jié)

綜上，PCOS為代謝性疾病，具有多基因遺傳傾向，其發(fā)病機(jī)制及病因尚不十分明確，對(duì)PCOS的研究目前已涉及多個(gè)領(lǐng)導(dǎo)領(lǐng)域，在基因、脂肪細(xì)胞因子方面較集中，隨著醫(yī)療科技和醫(yī)學(xué)的進(jìn)一步發(fā)生，對(duì)PCOS的認(rèn)識(shí)也會(huì)加深，為治療中依據(jù)病因?qū)Ψ桨高M(jìn)行制定提供了依據(jù)，具有非常積極的作用。

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